Pāriet uz saturu
RKO
Audums
Resnās zarnas
Slimība
Resnās zarnas karcinoma

Dokumenti

RKO

Cell line · Preces numurs 305035

RKO cells are a human colorectal carcinoma cell line widely used in research related to colon cancer. They are derived from a moderately well-differentiat...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

RKO šūnas ir cilvēka kolorektālās karcinomas šūnu līnija, ko plaši izmanto ar resnās zarnas vēzi saistītos pētījumos. Tās ir iegūtas no vidēji labi diferencētas resnās zarnas adenokarcinomas, un tās izceļas ar savvaļas p53 tipa statusu, kas ir reti sastopams daudzu vēža šūnu līniju vidū. Šī īpašība padara RKO šūnas īpaši vērtīgas, lai pētītu p53 funkcijas un DNS labošanas un apoptozes šūnu mehānismus saistībā ar kolorektālo vēzi.

RKO šūnām ir epitēlija morfoloģija, un tām raksturīga ģenētiskā stabilitāte un spēja reaģēt uz dažādām ģenētiskām un farmakoloģiskām manipulācijām. Tās tiek izmantotas pētījumos, kuros galvenā uzmanība tiek pievērsta vēža progresijā iesaistītajiem molekulārajiem ceļiem, tostarp šūnu cikla regulācijai, signālu pārvadei un metastāzēm. RKO šūnas sniedz ieskatu par dažādu gēnu un vides faktoru lomu kolorektālā vēža attīstībā un piedāvā platformu pretvēža zāļu efektivitātes testēšanai.

Turklāt RKO šūnas tiek izmantotas, lai pētītu sarežģīto mijiedarbību starp vēža šūnām un to mikrovidi, kā arī imūnsistēmas reakciju uz audzēja šūnām. To jutība pret ķīmijterapeitiskiem līdzekļiem un starojumu padara tās piemērotas izmantošanai zāļu atklāšanā un izstrādē, palīdzot noteikt potenciālos terapeitiskos mērķus un novērtēt jaunas kolorektālā vēža ārstēšanas stratēģijas.

Kopumā RKO šūnas ir būtisks resurss kolorektālā vēža pētniecībā, kas būtiski veicina mūsu izpratni par slimības molekulāro bioloģiju un palīdz izstrādāt efektīvākus ārstēšanas veidus.

Audums
Resnās zarnas
Slimība
Resnās zarnas karcinoma

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija
Tumorogēns
Jā

04Identifikatori

Atsauce
RKO (Cytion kataloga numurs 305035)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0504

05Pazīmes un uzņēmība

Ekspresētie receptori
Urokināzes receptors (u-PAR)

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamīns, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion izstrādājuma numurs 820100a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS un 1% NEAA
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Etniskā piederība
Āfrikas