Siirry sisältöön
RKO
Kudos
Paksusuoli
Sairaus
Paksusuolen syöpä

Asiakirjat

RKO

Cell line · Tuotenumero 305035

RKO cells are a human colorectal carcinoma cell line widely used in research related to colon cancer. They are derived from a moderately well-differentiat...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

RKO-solut ovat ihmisen paksusuolen karsinooman solulinja, jota käytetään laajalti paksusuolen syöpään liittyvässä tutkimuksessa. Ne ovat peräisin kohtalaisen hyvin erilaistuneesta paksusuolen adenokarsinoomasta, ja niiden erityispiirteenä on villiintynyt p53-tyyppi, joka on harvinaista monissa syöpäsolulinjoissa. Tämä ominaisuus tekee RKO-soluista erityisen arvokkaita p53:n toimintojen sekä DNA:n korjauksen ja apoptoosin solumekanismien tutkimisessa paksusuolen syövän yhteydessä.

RKO-soluilla on epiteelimorfologia, ja niille on ominaista niiden geneettinen vakaus ja herkkyys erilaisille geneettisille ja farmakologisille manipulaatioille. Niitä käytetään tutkimuksissa, joissa keskitytään syövän etenemiseen liittyviin molekyylireitteihin, kuten solusyklin säätelyyn, signaalinsiirtoon ja etäpesäkkeisiin. RKO-solut tarjoavat tietoa eri geenien ja ympäristötekijöiden roolista paksusuolisyövän kehittymisessä ja alustan syöpälääkkeiden tehokkuuden testaamiseen.

Lisäksi RKO-soluja käytetään syöpäsolujen ja niiden mikroympäristön välisten monimutkaisten vuorovaikutusten sekä kasvainsoluihin kohdistuvan immuunivasteen tutkimiseen. Koska ne ovat herkkiä kemoterapeuttisille aineille ja säteilylle, ne soveltuvat käytettäviksi lääkkeiden löytämisessä ja kehittämisessä, mikä auttaa tunnistamaan mahdollisia terapeuttisia kohteita ja arvioimaan uusia paksu- ja peräsuolisyövän hoitostrategioita.

Kaiken kaikkiaan RKO-solut ovat keskeinen resurssi paksu- ja peräsuolisyövän tutkimuksessa, sillä ne edistävät merkittävästi taudin molekyylibiologian ymmärtämistä ja auttavat tehokkaampien hoitojen kehittämisessä.

Kudos
Paksusuoli
Sairaus
Paksusuolen syöpä

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteeli
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä

04Tunnisteet

Lähdeviite
RKO (Cytionin luettelonumero 305035)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_0504

05Ilmentyminen ja alttius

Ilmentyvät reseptorit
Urokinaasireseptori (u-PAR)

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiini, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytionin artikkelinumero 820100a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % FBS:llä ja 1 % NEAA:lla
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Etnisyys
Afrikkalainen