RKO
Cell line · Product number 305035
RKO cells are a human colorectal carcinoma cell line widely used in research related to colon cancer. They are derived from a moderately well-differentiat...
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01General information
- Description
As células RKO são uma linhagem celular de carcinoma colorretal humano amplamente utilizada em pesquisas relacionadas ao câncer de cólon. Elas são derivadas de um adenocarcinoma do cólon moderadamente bem diferenciado e se destacam por apresentarem o p53 no tipo selvagem, o que é incomum entre muitas linhagens celulares cancerosas. Essa característica torna as células RKO particularmente valiosas para o estudo das funções do p53 e dos mecanismos celulares de reparo do DNA e apoptose no contexto do câncer colorretal.
As células RKO apresentam morfologia epitelial e são caracterizadas por sua estabilidade genética e capacidade de resposta a uma variedade de manipulações genéticas e farmacológicas. Elas são utilizadas em estudos que se concentram nas vias moleculares envolvidas na progressão do câncer, incluindo regulação do ciclo celular, transdução de sinal e metástase. As células RKO fornecem insights sobre o papel de vários genes e fatores ambientais no desenvolvimento do câncer colorretal e oferecem uma plataforma para testar a eficácia de medicamentos anticâncer.
Além disso, as células RKO são utilizadas para explorar as interações complexas entre as células cancerosas e seu microambiente, bem como a resposta imunológica às células tumorais. Sua sensibilidade a agentes quimioterápicos e à radiação as torna adequadas para uso na descoberta e no desenvolvimento de medicamentos, ajudando a identificar alvos terapêuticos potenciais e a avaliar novas estratégias de tratamento para o câncer colorretal.
De modo geral, as células RKO são um recurso fundamental na pesquisa do câncer colorretal, contribuindo significativamente para nossa compreensão da biologia molecular da doença e auxiliando no desenvolvimento de tratamentos mais eficazes.
- Tissue
- Dois pontos
- Disease
- Carcinoma de cólon
02Classification
- Organism
- Human
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- Epithelial
- Tumourigenic
- Sim
04Identifiers
- Citation
- RKO (número de catálogo da Cytion 305035)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0504
05Expression and susceptibility
- Receptors expressed
- Receptor da uroquinase (u-PAR)
06Handling and culture
- Culture medium
- EMEM (MEM Eagle), contendo: 2 mM de L-glutamina, contendo: 2,2 g/L de NaHCO₃, contendo: EBSS (número de artigo da Cytion 820100a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.
- Supplements
- Adicione ao meio 10% de FBS e 1% de NEAA
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco.
- Fluid renewal
- 2 a 3 vezes por semana
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.
- Freeze medium
- Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
- Storage conditions
Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.
- Shipping conditions
As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.
08Donor
- Ethnicity
- africano
09Legal and safety
- Safety precautions
- Ao planejar o armazenamento de um criotubo em nitrogênio líquido para descongelamento futuro, é obrigatório seguir medidas de segurança rigorosas. É essencial o uso de luvas e roupas de proteção adequadas, além do uso obrigatório de máscara facial ou óculos de proteção durante a transferência de amostras congeladas para dentro ou para fora do tanque de nitrogênio líquido. Isso visa mitigar o risco de ferimentos decorrentes de possíveis explosões dos criotubos durante a remoção, o que pode resultar na projeção de fragmentos pontiagudos.
- Warranty
Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.
Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
