Mine otse sisu juurde
RKO
Kude
Colon
Haigus
Jämesoole kartsinoom

Dokumendid

RKO

Cell line · Toote number 305035

RKO cells are a human colorectal carcinoma cell line widely used in research related to colon cancer. They are derived from a moderately well-differentiat...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

RKO rakud on inimese kolorektaalkartsinoomi rakuliin, mida kasutatakse laialdaselt jämesoolevähiga seotud uuringutes. Need on saadud mõõdukalt diferentseerunud käärsoole adenokartsinoomist ja neid iseloomustab nende metsikut tüüpi p53 staatus, mis on paljude vähirakuliinide seas haruldane. See omadus muudab RKO rakud eriti väärtuslikuks p53 funktsioonide ning DNA parandamise ja apoptoosi rakumehhanismide uurimiseks jämesoolevähi kontekstis.

RKO rakkudel on epiteliaalne morfoloogia ning neid iseloomustab geneetiline stabiilsus ja tundlikkus mitmesuguste geneetiliste ja farmakoloogiliste manipulatsioonide suhtes. Neid kasutatakse uuringutes, mis keskenduvad vähi progresseerumisega seotud molekulaarradadele, sealhulgas rakutsükli regulatsioonile, signaaliülekandele ja metastaasile. RKO rakud annavad ülevaate erinevate geenide ja keskkonnategurite rollist kolorektaalvähi arengus ning pakuvad platvormi vähivastaste ravimite tõhususe testimiseks.

Lisaks kasutatakse RKO rakke vähirakkude ja nende mikrokeskkonna vaheliste keeruliste vastastikmõjude ning immuunvastuse uurimiseks kasvajarakkudele. Nende tundlikkus keemiaravimite ja kiirguse suhtes muudab nad sobivaks ravimite avastamiseks ja arendamiseks, aidates tuvastada potentsiaalseid terapeutilisi sihtmärke ja hinnata uusi kolorektaalvähi ravistrateegiaid.

Üldiselt on RKO rakud põhiline ressurss kolorektaalvähi uurimisel, aidates oluliselt kaasa haiguse molekulaarbioloogia mõistmisele ja tõhusamate ravimeetodite väljatöötamisele.

Kude
Colon
Haigus
Jämesoole kartsinoom

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteel
Tuumorigeenne
Jah

04Tunnused

Viide
RKO (Cytioni katalooginumber 305035)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0504

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Ekspresseeritud retseptorid
Urokinaasi retseptor (u-PAR)

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS ja 1% NEAAga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Etniline kuuluvus
Aafrika