Ga naar de inhoud
RKO
Weefsel
Kolon
Ziekte
Coloncarcinoom

Documenten

RKO

Cell line · Productnummer 305035

RKO cells are a human colorectal carcinoma cell line widely used in research related to colon cancer. They are derived from a moderately well-differentiat...

€430.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

RKO-cellen zijn een menselijke colorectaalcarcinoomcellijn die veel gebruikt wordt in onderzoek naar darmkanker. Ze zijn afkomstig van een matig goed gedifferentieerd adenocarcinoom van de dikke darm en vallen op door hun wild-type p53-status, wat niet gebruikelijk is bij veel kankercellijnen. Deze eigenschap maakt RKO-cellen bijzonder waardevol voor het bestuderen van p53-functies en de cellulaire mechanismen van DNA-herstel en apoptose in de context van colorectale kanker.

RKO cellen vertonen een epitheliale morfologie en worden gekenmerkt door hun genetische stabiliteit en responsiviteit op een verscheidenheid aan genetische en farmacologische manipulaties. Ze worden gebruikt in studies die zich richten op de moleculaire routes die betrokken zijn bij de progressie van kanker, waaronder celcyclusregulatie, signaaltransductie en metastase. RKO cellen geven inzicht in de rol van verschillende genen en omgevingsfactoren in de ontwikkeling van colorectale kanker en bieden een platform voor het testen van de werkzaamheid van medicijnen tegen kanker.

Daarnaast worden RKO-cellen gebruikt om de complexe interacties tussen kankercellen en hun micro-omgeving te onderzoeken, evenals de immuunrespons op tumorcellen. Hun gevoeligheid voor chemotherapeutische middelen en bestraling maakt ze geschikt voor gebruik bij het ontdekken en ontwikkelen van medicijnen, waardoor potentiële therapeutische doelen kunnen worden geïdentificeerd en nieuwe behandelstrategieën voor dikkedarmkanker kunnen worden geëvalueerd.

In het algemeen zijn RKO-cellen een fundamentele bron van onderzoek naar dikkedarmkanker, die aanzienlijk bijdraagt aan ons begrip van de moleculaire biologie van de ziekte en helpt bij de ontwikkeling van effectievere behandelingen.

Weefsel
Kolon
Ziekte
Coloncarcinoom

02Classificatie

Organisme
Mens
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheel
Tumorverwekkend
Ja

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
RKO (Cytion catalogusnummer 305035)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0504

05Expressie en vatbaarheid

Tot expressie gebrachte receptoren
Urokinase receptor (u-PAR)

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS en 1% NEAA
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Etnische afkomst
Afrikaans