Preskoči na vsebino
RKO
Tkivo
Debelo črevo
Bolezen
Karcinom debelega črevesa

Dokumenti

RKO

Cell line · Številka izdelka 305035

RKO cells are a human colorectal carcinoma cell line widely used in research related to colon cancer. They are derived from a moderately well-differentiat...

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celice RKO so celična linija človeškega kolorektalnega karcinoma, ki se pogosto uporablja v raziskavah, povezanih z rakom debelega črevesa. Izhajajo iz zmerno dobro diferenciranega adenokarcinoma debelega črevesa in se odlikujejo po divjem tipu p53, ki je redek med številnimi rakavimi celičnimi linijami. Zaradi te lastnosti so celice RKO še posebej dragocene za preučevanje delovanja p53 ter celičnih mehanizmov popravljanja DNK in apoptoze pri raku debelega črevesa in danke.

Celice RKO imajo epitelijsko morfologijo, zanje sta značilni genetska stabilnost in odzivnost na različne genetske in farmakološke manipulacije. Uporabljajo se v študijah, ki se osredotočajo na molekularne poti, vključene v napredovanje raka, vključno z uravnavanjem celičnega cikla, prenosom signalov in metastaziranjem. Celice RKO omogočajo vpogled v vlogo različnih genov in okoljskih dejavnikov pri razvoju raka debelega črevesa in danke ter ponujajo platformo za testiranje učinkovitosti zdravil proti raku.

Poleg tega se celice RKO uporabljajo za raziskovanje zapletenih interakcij med rakavimi celicami in njihovim mikrookoljem ter imunskega odziva na tumorske celice. Zaradi njihove občutljivosti na kemoterapevtska sredstva in sevanje so primerne za uporabo pri odkrivanju in razvoju zdravil, kar pomaga pri prepoznavanju potencialnih terapevtskih ciljev in ocenjevanju novih strategij zdravljenja raka debelega črevesa in danke.

Na splošno so celice RKO temeljni vir pri raziskavah kolorektalnega raka, saj pomembno prispevajo k razumevanju molekularne biologije te bolezni in pomagajo pri razvoju učinkovitejših načinov zdravljenja.

Tkivo
Debelo črevo
Bolezen
Karcinom debelega črevesa

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijski
Tumorigeničen
Da

04Identifikatorji

Navajanje vira
RKO (kataloška številka Cytion 305035)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0504

05Izražanje in dovzetnost

Izraženi receptorji
Receptor za urokinazo (u-PAR)

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (številka izdelka Cytion 820100a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS in 1 % NEAA
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Etnična pripadnost
Afriški