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- Tissue
- Poumon
- Disease
- Carcinome à grandes cellules
- Metastatic site
- Épanchement pleural
- Synonyms
- LCLC103H, Large Cell Lung Cancer-103H
Documents
Cellules LCLC-103H
Cell line · Product number 300169
The LCLC-103H cell line is derived from a large cell lung carcinoma (LCLC), specifically established from the pleural effusion of an adult male patient wi...
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01General information
- Description
La lignée cellulaire LCLC-103H est issue d’un carcinome pulmonaire à grandes cellules (LCLC), plus précisément établie à partir de l’épanchement pleural d’un patient adulte de sexe masculin chez qui un carcinome pulmonaire à grandes cellules avec cellules géantes avait été diagnostiqué. Le patient avait déjà subi une chimiothérapie et une radiothérapie. Cette lignée cellulaire se distingue notamment par l’expression partielle de marqueurs neuroendocriniens, généralement associés au cancer du poumon à petites cellules (SCLC) et à certaines tumeurs neuroendocrines. Plus précisément, l’antigène détecté par l’anticorps monoclonal RNL-1 présente une expression superficielle focale dans les cellules LCLC-103H, similaire à celle observée dans certains carcinomes neuroendocriniens. Toutefois, cette expression n’est pas uniforme dans toutes les cellules, ce qui indique une hétérogénéité au sein de la population cellulaire.
La lignée LCLC-103H a été décrite dans la littérature comme étant négative à la coloration PAS (acide périodique-Schiff), ce qui la distingue des autres sous-types de cancer du poumon. Elle présente également une formation stromale remarquable, qui constitue une caractéristique importante de son profil histopathologique. De plus, cette lignée cellulaire est connue pour surexprimer le proto-oncogène MYC, qui joue un rôle crucial dans la prolifération cellulaire et la tumorigenèse. Des études immunocytochimiques ont montré que la lignée LCLC-103H ne présente pas l’ensemble du spectre de différenciation neuroendocrine observé dans le SCLC, car elle ne réagit pas à d’autres marqueurs neuroendocriniens, tels que ceux identifiés par les anticorps RNL-2 et RNL-3. Cette distinction est cruciale pour différencier le LCLC du SCLC, qui est plus agressif et présente généralement une plus grande sensibilité à certains agents chimiothérapeutiques. Le profil d’expression unique de la lignée LCLC-103H en fait un modèle précieux pour l’étude des caractéristiques moléculaires et immunologiques du carcinome pulmonaire à grandes cellules et de son chevauchement avec les caractéristiques neuroendocrines.
- Tissue
- Poumon
- Disease
- Carcinome à grandes cellules
- Metastatic site
- Épanchement pleural
- Synonyms
- LCLC103H
- Large Cell Lung Cancer-103H
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- Pléomorphe
- Ploidy status
- Aneuploïde
- Doubling time
- 26 heures
04Identifiers
- Citation
- LCLC-103H (numéro de catalogue Cytion 300169)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1375
05Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, contenant 2,0 mM de glutamine stable et 2,0 g/L de NaHCO₃ (numéro d'article Cytion 820700a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.
- Supplements
- Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
- Seeding density
- de 0,5 à 1 × 10⁴ cellules/cm²
- Fluid renewal
- 2 à 3 fois par semaine
- Post-thaw recovery
- Les cellules se remettront de la congélation en moins de 24 heures.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.
Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.
- Freeze medium
- Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
- Storage conditions
Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.
- Shipping conditions
Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.
07Donor
- Donor age
- 61 ans
- Ethnicity
- caucasien
08Legal and safety
- Safety precautions
- Lorsqu’on prévoit entreposer un cryotube dans de l’azote liquide en vue d’une décongélation ultérieure, il est impératif de respecter des mesures de sécurité rigoureuses. Le port de gants et de vêtements de protection appropriés est essentiel, et l’utilisation d’un masque facial ou de lunettes de protection est obligatoire lors du transfert d’échantillons congelés vers ou depuis le réservoir d’azote liquide. Cette précaution vise à réduire le risque de blessure causé par d’éventuelles explosions de cryotubes lors de leur retrait, pouvant entraîner la projection de fragments coupants.
- Warranty
Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.
Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.
- Material Transfer Agreement required
- Yes