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- Tecido
- Pulmão
- Doença
- Carcinoma de células grandes
- Local da metástase
- Derrame pleural
- Sinónimos
- LCLC103H, Large Cell Lung Cancer-103H
Documentos
Células LCLC-103H
Cell line · Número do produto 300169
A linha celular LCLC-103H é derivada de um carcinoma pulmonar de células grandes (LCLC), especificamente isolada a partir do derrame pleural de um doente adulto do sexo masculino com...
Personalização / Recomendações
- Células LCLC-103HCell line€430.00
Recomendado (lote mais recente)
01Informações gerais
- Descrição
A linha celular LCLC-103H é derivada de um carcinoma pulmonar de grandes células (LCLC), especificamente estabelecido a partir do derrame pleural de um doente adulto do sexo masculino com um diagnóstico de carcinoma pulmonar de grandes células com células gigantes. O doente tinha sido previamente submetido a quimioterapia e radioterapia. Esta linha celular é particularmente notável pela sua expressão parcial de marcadores neuroendócrinos, que estão tipicamente associados ao cancro do pulmão de pequenas células (SCLC) e a certos tumores neuroendócrinos. Em particular, o antigénio detectado pelo anticorpo monoclonal RNL-1 mostra uma expressão de superfície focal nas células LCLC-103H, semelhante à observada em alguns carcinomas neuroendócrinos. No entanto, a expressão não é uniforme em todas as células, indicando heterogeneidade na população celular.
O LCLC-103H foi descrito na literatura como PAS (Periodic Acid-Schiff) negativo, distinguindo-o de outros subtipos de cancro do pulmão. Apresenta também uma notável formação de estroma, que é uma caraterística significativa do seu perfil histopatológico. Além disso, esta linha celular é conhecida por sobre-expressar o proto-oncogene MYC, que desempenha um papel crítico na proliferação celular e na tumorigénese. Estudos imunocitoquímicos demonstraram que a LCLC-103H não apresenta o espetro completo de diferenciação neuroendócrina observado no CPPC, uma vez que não apresenta reatividade com outros marcadores neuroendócrinos, como os identificados pelos anticorpos RNL-2 e RNL-3. Esta distinção é crucial para diferenciar o LCLC do SCLC, que é mais agressivo e apresenta normalmente uma maior sensibilidade a determinados agentes quimioterapêuticos. O perfil de expressão único do LCLC-103H torna-o um modelo valioso para o estudo das caraterísticas moleculares e imunológicas do carcinoma pulmonar de grandes células e da sua sobreposição com caraterísticas neuroendócrinas.
- Tecido
- Pulmão
- Doença
- Carcinoma de células grandes
- Local da metástase
- Derrame pleural
- Sinónimos
- LCLC103H
- Large Cell Lung Cancer-103H
02Classificação
- Organismo
- Humano
- Sexo
- Masculino
- Propriedades de crescimento
- Aderente
- Nível de biossegurança
- 1
03Características
- Morfologia
- Pleomorfo
- Estado de ploidia
- Aneuploide
- Tempo de duplicação
- 26 horas
04Identificadores
- Referência
- LCLC-103H (número de catálogo Cytion 300169)
- Número de identificação fiscal do NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1375
05Manuseamento e cultura
- Meio de cultura
- RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
- Atmosfera de incubação
37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.
- Suplementos
- Completar o meio com 10% de FBS
- Reagente de dissociação
- Accutase
- Subcultura
- Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
- Densidade de sementeira
- 0,5 a 1 x 104 células/cm2
- Renovação de fluidos
- 2 a 3 vezes por semana
- Recuperação após o descongelamento
- As células recuperam da congelação em 24 horas.
- Descongelamento e cultura
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Controlo de qualidade e criopreservação
- Esterilidade
A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.
- Meio de congelação
- Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
- Condições de armazenamento
Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.
- Condições de envio
As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.
07Doador
- Idade do dador
- 61 anos
- Etnia
- Caucasiano
08Aspectos legais e de segurança
- Precauções de segurança
- Quando se planeia armazenar um criovial em nitrogénio líquido para descongelação futura, é obrigatório aderir a medidas de segurança rigorosas. Luvas e vestuário de proteção adequados são essenciais, e a utilização de uma máscara facial ou óculos de segurança é necessária durante a transferência de amostras congeladas para ou do tanque de nitrogénio líquido. Isto destina-se a mitigar o risco de ferimentos provocados por potenciais explosões de crioviais após a remoção, que podem resultar na projeção de fragmentos afiados.
- Garantia
Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto
Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia
- É necessário um Acordo de Transferência de Material
- Sim