Премини към съдържанието
Клетки LCLC-103H
Тъкан
Бял дроб
Заболяване
Голямоклетъчен карцином
Място на метастазите
Плеврален излив
Синоними
LCLC103H, Large Cell Lung Cancer-103H

Документи

Клетки LCLC-103H

Cell line · Номер на продукта 300169

Клетъчната линия LCLC-103H е получена от гоноклетъчен белодробен карцином (LCLC), специално изолиран от плеврален излив на възрастен мъж с...

€430.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия LCLC-103H е получена от едроклетъчен белодробен карцином (LCLC), специално създаден от плевралния излив на възрастен пациент от мъжки пол с диагноза едроклетъчен белодробен карцином с гигантски клетки. Преди това пациентът е бил подложен на химиотерапия и лъчетерапия. Тази клетъчна линия се отличава с частична експресия на невроендокринни маркери, които обикновено се свързват с дребноклетъчния белодробен карцином (SCLC) и някои невроендокринни тумори. По-специално, антигенът, открит чрез моноклонално антитяло RNL-1, показва фокална повърхностна експресия в клетките LCLC-103H, подобна на тази, наблюдавана при някои невроендокринни карциноми. Експресията обаче не е равномерна във всички клетки, което показва хетерогенност в рамките на клетъчната популация.

LCLC-103H е описан в литературата като PAS (Periodic Acid-Schiff) негативен, което го отличава от други подтипове на белодробен рак. Той също така показва забележително образуване на строма, което е съществена характеристика на хистопатологичния му профил. Освен това за тази клетъчна линия е известно, че свръхекспресира протоонкогена MYC, който играе решаваща роля в клетъчната пролиферация и туморогенезата. Имуноцитохимичните изследвания показват, че LCLC-103H не проявява пълния спектър на невроендокринна диференциация, наблюдавана при SCLC, тъй като липсва реактивност с други невроендокринни маркери, като тези, идентифицирани с антитела RNL-2 и RNL-3. Това разграничение е от решаващо значение за разграничаване на LCLC от SCLC, който е по-агресивен и обикновено проявява по-висока чувствителност към определени химиотерапевтични средства. Уникалният експресионен профил на LCLC-103H го прави ценен модел за изучаване на молекулярните и имунологичните характеристики на едроклетъчния белодробен карцином и припокриването му с невроендокринни характеристики.

Тъкан
Бял дроб
Заболяване
Голямоклетъчен карцином
Място на метастазите
Плеврален излив
Синоними
  • LCLC103H
  • Large Cell Lung Cancer-103H

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Мъж
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Плеоморф
Плоидност
Анеуплоидни
Време за удвояване
26 часа

04Идентификатори

Източник
LCLC-103H (каталожен номер 300169 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_1375

05Обработка и отглеждане

Хранителна среда
RPMI 1640, w: 2,0 mM стабилен глутамин, w: 2,0 g/L NaHCO3 (номер на статията в Cytion 820700a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Плътност на засяването
0,5 до 1 x 104 клетки/cm2
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Възстановяване след размразяване
Клетките се възстановяват от замразяване в рамките на 24 часа.
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

07Дарител

Възраст на донора
61 години
Етническа принадлежност
Кавказки