Przejdź do treści
Komórki LCLC-103H
Chusteczka
Płuco
Choroba
Rak wielkokomórkowy
Miejsce przerzutów
Wysięk opłucnowy
Synonimy
LCLC103H, Large Cell Lung Cancer-103H

Dokumenty

Komórki LCLC-103H

Cell line · Numer produktu 300169

Linia komórkowa LCLC-103H pochodzi z wielkokomórkowego raka płuca (LCLC) i została wyhodowana konkretnie z wysięku opłucnowego dorosłego pacjenta płci męskiej z...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa LCLC-103H wywodzi się z wielkokomórkowego raka płuca (LCLC), specjalnie utworzonego z wysięku opłucnowego dorosłego mężczyzny z rozpoznaniem wielkokomórkowego raka płuca z komórkami olbrzymimi. Pacjent był wcześniej poddawany chemioterapii i radioterapii. Ta linia komórkowa jest szczególnie godna uwagi ze względu na częściową ekspresję markerów neuroendokrynnych, które są zwykle związane z drobnokomórkowym rakiem płuc (SCLC) i niektórymi guzami neuroendokrynnymi. W szczególności antygen wykrywany przez przeciwciało monoklonalne RNL-1 wykazuje ogniskową ekspresję powierzchniową w komórkach LCLC-103H, podobną do obserwowanej w niektórych rakach neuroendokrynnych. Jednak ekspresja nie jest jednolita we wszystkich komórkach, co wskazuje na heterogenność w populacji komórek.

LCLC-103H został opisany w literaturze jako PAS (Periodic Acid-Schiff) ujemny, co odróżnia go od innych podtypów raka płuc. Wykazuje również niezwykłe tworzenie zrębu, co jest istotną cechą jego profilu histopatologicznego. Ponadto wiadomo, że ta linia komórkowa wykazuje nadekspresję protoonkogenu MYC, który odgrywa kluczową rolę w proliferacji komórek i nowotworzeniu. Badania immunocytochemiczne wykazały, że LCLC-103H nie wykazuje pełnego spektrum różnicowania neuroendokrynnego obserwowanego w SCLC, ponieważ brakuje mu reaktywności z innymi markerami neuroendokrynnymi, takimi jak te identyfikowane przez przeciwciała RNL-2 i RNL-3. To rozróżnienie ma kluczowe znaczenie dla odróżnienia LCLC od SCLC, który jest bardziej agresywny i zazwyczaj wykazuje wyższą wrażliwość na niektóre środki chemioterapeutyczne. Unikalny profil ekspresji LCLC-103H czyni go cennym modelem do badania molekularnych i immunologicznych cech wielkokomórkowego raka płuc i jego nakładania się z cechami neuroendokrynnymi.

Chusteczka
Płuco
Choroba
Rak wielkokomórkowy
Miejsce przerzutów
Wysięk opłucnowy
Synonimy
  • LCLC103H
  • Large Cell Lung Cancer-103H

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Pleomorf
Status ploidii
Aneuploid
Czas podwojenia
26 godzin

04Identyfikatory

Źródło
LCLC-103H (numer katalogowy Cytion 300169)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1375

05Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
0,5 do 1 x 104 komórek/cm2
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Komórki zregenerują się po zamrożeniu w ciągu 24 godzin.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

07Darczyńca

Wiek dawcy
61 lat
Pochodzenie etniczne
Kaukaski