Mine otse sisu juurde
LCLC-103H rakud
Kude
Kopsud
Haigus
Suurrakuline kartsinoom
Metastaaside asukoht
Pleuraefusioon
Sünonüümid
LCLC103H, Large Cell Lung Cancer-103H

Dokumendid

LCLC-103H rakud

Cell line · Toote number 300169

Rakuliin LCLC-103H on saadud suurrakulise kopsuvähist (LCLC), mis on spetsiaalselt loodud täiskasvanud meespatsiendi pleuraefusioonist, kellel oli...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

LCLC-103H rakuliin on saadud suurrakulise kopsukartsinoomi (LCLC) rakust, mis on spetsiaalselt loodud täiskasvanud meessoost patsiendi pleuraefusioonist, kellel on diagnoositud suurrakuline kopsukartsinoom koos hiidrakkudega. Patsient oli eelnevalt läbinud keemia- ja kiiritusravi. See rakuliin on eriti tähelepanuväärne neuroendokriinsete markerite osalise ekspressiooni poolest, mis on tavaliselt seotud väikerakk-kopsuvähi (SCLC) ja teatavate neuroendokriinsete kasvajatega. Eelkõige näitab monoklonaalse antikeha RNL-1 abil tuvastatud antigeen LCLC-103H rakkudes fokaalset pinnaekspressiooni, mis sarnaneb mõne neuroendokriinsete kartsinoomi puhul täheldatud ekspressiooniga. Ekspressioon ei ole siiski kõigis rakkudes ühtlane, mis viitab heterogeensusele rakupopulatsiooni sees.

LCLC-103H on kirjanduses kirjeldatud PAS (perioodiline hape-Schiff) negatiivsena, mis eristab seda teistest kopsuvähi alatüüpidest. Samuti on sellel märkimisväärne stroomi moodustumine, mis on selle histopatoloogilise profiili oluline tunnusjoon. Lisaks sellele on teada, et see rakuliin üleekspresseerib proto-onkogeeni MYC, mis mängib kriitilist rolli rakkude proliferatsioonis ja kasvajate tekkimises. Immunotsütokeemilised uuringud on näidanud, et LCLC-103H ei näita kogu neuroendokriinset diferentseerumist, mida SCLC-l täheldatakse, kuna tal puudub reaktsioon teiste neuroendokriinsete markerite suhtes, nagu need, mis on tuvastatud antikehade RNL-2 ja RNL-3 abil. See erinevus on oluline LCLC eristamisel SCLC-st, mis on agressiivsem ja tavaliselt tundlikum teatavate kemoterapeutiliste ainete suhtes. LCLC-103H ainulaadne ekspressiooniprofiil teeb sellest väärtusliku mudeli, mille abil uurida suurrakulise kopsukartsinoomi molekulaarseid ja immunoloogilisi omadusi ning selle kattumist neuroendokriinsete tunnustega.

Kude
Kopsud
Haigus
Suurrakuline kartsinoom
Metastaaside asukoht
Pleuraefusioon
Sünonüümid
  • LCLC103H
  • Large Cell Lung Cancer-103H

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Pleomorfne
Ploidsus
Aneuploidne
Kahekordistumisaeg
26 tundi

04Tunnused

Viide
LCLC-103H (Cytioni katalooginumber 300169)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1375

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
0,5 kuni 1 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Rakud taastuvad külmutamisest 24 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Doonori vanus
61 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia