Pāriet uz saturu
LCLC-103H šūnas
Audums
Plaušas
Slimība
Lielo šūnu karcinoma
Metastāžu vieta
Pleiras izsvīdums
Sinonīmi
LCLC103H, Large Cell Lung Cancer-103H

Dokumenti

LCLC-103H šūnas

Cell line · Preces numurs 300169

LCLC-103H šūnu līnija ir iegūta no lielšūnu plaušu karcinomas (LCLC), kas tika izveidota, izmantojot pleiras izsvīdumu no pieauguša vīrieša pacienta ar...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

LCLC-103H šūnu līnija ir iegūta no lielšūnu plaušu karcinomas (LCLC), kas īpaši izveidota no pleiras izplūduma pieaugušam vīrietim ar diagnozi lielšūnu plaušu karcinoma ar milzu šūnām. Pacientam iepriekš bija veikta ķīmijterapija un staru terapija. Šī šūnu līnija īpaši izceļas ar daļēju neiroendokrīno marķieru ekspresiju, kas parasti ir saistīti ar mazšūnu plaušu vēzi (SCLC) un dažiem neiroendokrīniem audzējiem. Jo īpaši ar monoklonālo antivielu RNL-1 noteiktajam antigēnam LCLC-103H šūnās ir fokāla virsmas ekspresija, līdzīga tai, kas novērota dažos neiroendokrīnos karcinomos. Tomēr ekspresija nav vienmērīga visās šūnās, kas norāda uz šūnu populācijas heterogenitāti.

Literatūrā LCLC-103H ir aprakstīts kā PAS (periodiskā skābes-Schiff) negatīvs, kas to atšķir no citiem plaušu vēža apakštipiem. Tam ir arī ievērojama stromas veidošanās, kas ir nozīmīga tā histopatoloģiskā profila iezīme. Turklāt ir zināms, ka šī šūnu līnija pārmērīgi ekspresē protoonkogēnu MYC, kam ir būtiska nozīme šūnu proliferācijā un audzēju rašanās procesā. Imunocitoķīmiskie pētījumi ir parādījuši, ka LCLC-103H neizpauž pilnu neiroendokrīnās diferenciācijas spektru, kas novērojams SCLC, jo tai trūkst reaktivitātes ar citiem neiroendokrīnajiem marķieriem, piemēram, ar antivielām RNL-2 un RNL-3 identificētajiem. Šī atšķirība ir būtiska, lai LCLC atšķirtu no SCLC, kas ir agresīvāks un parasti ir jutīgāks pret noteiktiem ķīmijterapeitiskiem līdzekļiem. LCLC-103H unikālais ekspresijas profils padara to par vērtīgu modeli lielšūnu plaušu karcinomas molekulāro un imunoloģisko īpašību un tās pārklāšanās ar neiroendokrīnajām pazīmēm izpētei.

Audums
Plaušas
Slimība
Lielo šūnu karcinoma
Metastāžu vieta
Pleiras izsvīdums
Sinonīmi
  • LCLC103H
  • Large Cell Lung Cancer-103H

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Pleomorfs
Ploidijas statuss
Aneuploīds
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
26 stundas

04Identifikatori

Atsauce
LCLC-103H (Cytion kataloga numurs 300169)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1375

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
0,5 līdz 1 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Šūnas pēc sasaldēšanas atveseļojas 24 stundu laikā.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
61 gads
Etniskā piederība
Kaukāzietis