Siirry sisältöön
LCLC-103H-solut
Kudos
Keuhkot
Sairaus
Suurisoluinen karsinooma
Metastaasikohde
Pleuraeffuusio
Synonyymit
LCLC103H, Large Cell Lung Cancer-103H

Asiakirjat

LCLC-103H-solut

Cell line · Tuotenumero 300169

LCLC-103H-solulinja on peräisin suurisoluista keuhkosyövästä (LCLC), ja se on perustettu nimenomaan aikuisen miespotilaan keuhkopussinesteestä, jolla oli...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja

Räätälöinti / Suositukset

Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

LCLC-103H-solulinja on peräisin suurisoluisesta keuhkokarsinoomasta (LCLC), joka on peräisin aikuisen miespotilaan pleuraeritteestä, jolla on diagnosoitu suurisoluinen keuhkokarsinooma, jossa on jättiläissoluja. Potilas oli aiemmin saanut kemo- ja sädehoitoa. Tämä solulinja erottuu erityisesti siitä, että se ilmentää osittain neuroendokriinisiä merkkiaineita, jotka tyypillisesti liittyvät pienisoluiseen keuhkosyöpään (SCLC) ja tiettyihin neuroendokriinisiin kasvaimiin. Erityisesti monoklonaalisella vasta-aineella RNL-1 havaittu antigeeni ilmentyy LCLC-103H:n soluissa keskitetysti pinnalla, kuten joissakin neuroendokriinisissä karsinoomissa on havaittu. Ekspressio ei kuitenkaan ole yhtenäinen kaikissa soluissa, mikä viittaa solupopulaation sisäiseen heterogeenisuuteen.

LCLC-103H on kirjallisuudessa kuvattu PAS-negatiiviseksi (Periodic Acid-Schiff), mikä erottaa sen muista keuhkosyövän alatyypeistä. Siinä on myös huomattavaa strooman muodostumista, mikä on merkittävä piirre sen histopatologisessa profiilissa. Lisäksi tämän solulinjan tiedetään yliekspressoivan MYC-proto-onkogeenia, jolla on kriittinen rooli solujen lisääntymisessä ja kasvainten synnyssä. Immunosytokemialliset tutkimukset ovat osoittaneet, että LCLC-103H:lla ei ole SCLC:ssä havaittavaa neuroendokriinisen erilaistumisen koko kirjoa, sillä se ei reagoi muihin neuroendokriinisiin merkkiaineisiin, kuten RNL-2- ja RNL-3-vasta-aineiden tunnistamiin merkkiaineisiin. Tämä ero on ratkaisevan tärkeä LCLC:n erottamiseksi SCLC:stä, joka on aggressiivisempi ja tyypillisesti herkempi tietyille kemoterapeuttisille aineille. LCLC-103H:n ainutlaatuinen ilmentymisprofiili tekee siitä arvokkaan mallin suurisoluisen keuhkosyövän molekulaaristen ja immunologisten ominaisuuksien ja sen neuroendokriinisten piirteiden päällekkäisyyden tutkimiseen.

Kudos
Keuhkot
Sairaus
Suurisoluinen karsinooma
Metastaasikohde
Pleuraeffuusio
Synonyymit
  • LCLC103H
  • Large Cell Lung Cancer-103H

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Pleomorfinen
Ploidisuus
Aneuploidinen
Kaksinkertaistumisaika
26 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
LCLC-103H (Cytionin luettelonumero 300169)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_1375

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
0,5–1 x 104 solua/cm2
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Solut toipuvat jäädytyksestä 24 tunnin kuluessa.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
61 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen