Células LCLC-103H

A linhagem celular LCLC-103H é derivada de um carcinoma pulmonar de células grandes (LCLC), estabelecida especificamente a partir do derrame pleural de um paciente adulto do sexo masculino com diagnóstico de carcinoma pulmonar de células grandes com células gigantes. O paciente havia sido submetido anteriormente a quimioterapia e radioterapia. Essa linha celular se destaca particularmente por sua expressão parcial de marcadores neuroendócrinos, que são tipicamente associados ao câncer de pulmão de pequenas células (SCLC) e a certos tumores neuroendócrinos. Em particular, o antígeno detectado pelo anticorpo monoclonal RNL-1 apresenta uma expressão superficial focal nas células LCLC-103H, semelhante à observada em alguns carcinomas neuroendócrinos. No entanto, a expressão não é uniforme em todas as células, indicando heterogeneidade na população celular.

A LCLC-103H foi descrita na literatura como negativa para PAS (ácido periódico-Schiff), o que a distingue de outros subtipos de câncer de pulmão. Ela também apresenta notável formação de estroma, o que é uma característica significativa de seu perfil histopatológico. Além disso, sabe-se que essa linhagem celular superexpressa o proto-oncogene MYC, que desempenha um papel crítico na proliferação celular e na tumorigênese. Estudos imunocitoquímicos demonstraram que a LCLC-103H não apresenta todo o espectro de diferenciação neuroendócrina observado no SCLC, uma vez que não apresenta reatividade com outros marcadores neuroendócrinos, como aqueles identificados pelos anticorpos RNL-2 e RNL-3. Essa distinção é crucial para diferenciar o LCLC do SCLC, que é mais agressivo e normalmente apresenta maior sensibilidade a certos agentes quimioterápicos. O perfil de expressão único da LCLC-103H torna-a um modelo valioso para o estudo das características moleculares e imunológicas do carcinoma pulmonar de células grandes e sua sobreposição com características neuroendócrinas.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.