HTR-8/SVneo

HTR-8/SVneo est une lignée cellulaire trophoblastique humaine dérivée des villosités choriales d’un placenta du premier trimestre, plus précisément d’un embryon âgé de 6 à 12 semaines. Ces cellules ont été immortalisées par transfection avec le gène codant pour le grand antigène T du virus simien 40 (SV40), ce qui prolonge leur durée de vie tout en conservant les caractéristiques typiques des trophoblastes invasifs extravillous. Cette lignée cellulaire exprime plusieurs marqueurs clés associés aux trophoblastes invasifs extravillos, notamment le facteur de croissance analogue à l’insuline II (IGF-II), le NDOG-5, l’antigène nucléaire des cellules en prolifération (PCNA) et toute une gamme d’intégrines (sous-unités α1, α3, α5, αv et β1, ainsi que le récepteur de la vitronectine αvβ3/β5). Elle est négative pour le marqueur des macrophages 63/D3, le facteur VIII (marqueur des cellules endothéliales) et les sous-unités d’intégrines α6 et β4, ce qui confirme son origine trophoblastique et la distingue d’autres types cellulaires tels que les macrophages et les cellules endothéliales.

Les cellules HTR-8/SVneo sont largement utilisées comme modèle pour étudier l’invasion trophoblastique et la biologie placentaire, en particulier la transition épithélio-mésenchymateuse (TEM), qui est cruciale pour le comportement invasif des trophoblastes au cours du développement placentaire. Des recherches ont montré que ces cellules présentent une population mixte de phénotypes épithéliaux et mésenchymateux, avec la capacité de subir une EMT dans des conditions de culture standard. Cette transition est médiée par la voie de signalisation du TGF-β, qui favorise le phénotype mésenchymateux, comme en témoignent la surexpression de marqueurs mésenchymateux tels que la vimentine et la sous-expression de marqueurs épithéliaux comme l’E-cadhérine. Cela fait de HTR-8/SVneo un modèle in vitro précieux pour l’étude des mécanismes moléculaires sous-jacents à la transition épithélio-mésenchymateuse (EMT) chez les trophoblastes et de ses implications tant dans le développement placentaire normal que dans les troubles liés à la grossesse.

Des études ont en outre démontré que les cellules HTR-8/SVneo peuvent former des sphéroïdes, qui expriment principalement des marqueurs épithéliaux. Lorsque ces sphéroïdes sont repiqués en culture 2D, les cellules présentent une évolution vers un phénotype mésenchymateux, indiquant un processus d’EMT en cours. Les propriétés uniques de cette lignée cellulaire, notamment sa réactivité au TGF-β et sa nature mixte épithélio-mésenchymateuse, fournissent des informations essentielles sur la dynamique cellulaire complexe de l’invasion trophoblastique et la régulation du développement placentaire, offrant ainsi une plateforme solide pour l’étude des pathologies liées à la grossesse, telles que la prééclampsie et le retard de croissance intra-utérin.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.