HTR-8/SVneo

HTR-8/SVneo הוא קו תאים טרופובלסטיים אנושיים שמקורם בזקיקי הכוריוני של שליה בשליש הראשון של ההריון, ובאופן ספציפי מעובר בן 6 עד 12 שבועות. תאים אלה הונצחו על ידי העברת הגן המקודד לאנטיגן T הגדול של נגיף הקוף 40 (SV40), המאריך את תוחלת החיים שלהם תוך שמירה על המאפיינים האופייניים לטרופובלסטים פולשניים מחוץ לזקיקים. קו תאים זה מבטא מספר סמנים מרכזיים הקשורים לטרופובלסטים חוץ-זיזיים, כולל גורם גדילה דמוי אינסולין II (IGF-II), NDOG-5, אנטיגן גרעיני של תאים מתרבים (PCNA) ומגוון אינטגרינים (α1, α3, α5, αv ו-β1, יחד עם αvβ3/β5 vitronectin receptor). הוא שלילי לסמן מקרופאג 63/D3, לסמן תאי אנדותל גורם VIII, ולסוב-יחידות אינטגרין α6 ו-β4, מה שמאשר את השושלת הטרופובלסטית שלו ומבדיל אותו מסוגי תאים אחרים כגון מקרופאגים ותאי אנדותל.

תאי HTR-8/SVneo משמשים באופן נרחב כמודל לחקר פלישת טרופובלסט וביולוגיה של השליה, ובפרט המעבר מאפיתל למזנכימלי (EMT), שהוא חיוני להתנהגות הפולשנית של טרופובלסטים במהלך התפתחות השליה. מחקרים הראו שתאים אלה מציגים אוכלוסייה מעורבת של פנוטיפים אפיתלליים ומזנכימליים, עם יכולת לעבור EMT בתנאי תרבית סטנדרטיים. מעבר זה מתווך על ידי איתות TGF-β, המקדם את הפנוטיפ המזנכימלי, כפי שמעיד העלייה ברגולציה של סמנים מזנכימליים כגון וימנטין והירידה ברגולציה של סמנים אפיתל כגון E-cadherin. זה הופך את HTR-8/SVneo למודל חשוב במבחנה לחקר המנגנונים המולקולריים העומדים בבסיס EMT בטרופובלסטים והשלכותיו הן על התפתחות השליה התקינה והן על הפרעות הקשורות להריון.

מחקרים הוכיחו עוד כי תאי HTR-8/SVneo יכולים ליצור ספרואידים, המבטאים בעיקר סמנים אפיתל. כאשר ספרואידים אלה מונחים מחדש בתרבית דו-ממדית, התאים מפגינים מעבר לפנוטיפ מזנכימלי, המעיד על תהליך EMT מתמשך. התכונות הייחודיות של קו תאים זה, כולל תגובתיותו ל-TGF-β ואופיו המעורב של אפיתל-מזנכימלי, מספקות תובנות קריטיות על הדינמיקה התאית המורכבת של פלישת טרופובלסטים והוויסות של התפתחות השליה, ומציעות פלטפורמה איתנה לחקר פתולוגיות הקשורות להריון, כגון רעלת הריון והאטה בגדילה תוך-רחמית.

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו