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HTR-8/SVneo
Tissue
滋養層、胎盤
Synonyms
HTR-8/SV neo, HTR-8/SV-neo, HTR8/SVneo, HTR8svn

Documents

HTR-8/SVneo

Cell line · Product number 305221

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

HTR-8/SVneo 是一種源自妊娠第一孕期胎盤絨毛的人類滋養層細胞系,具體而言是來自孕齡 6 至 12 週的胚胎。 這些細胞透過轉染編碼猿病毒 40 型(SV40)大 T 抗原的基因而獲得永生化,此舉不僅延長了其壽命,同時也維持了非絨毛侵襲性滋養層細胞的典型特徵。 該細胞系表達與絨毛外滋養層細胞相關的數種關鍵標記物,包括胰島素樣生長因子 II(IGF-II)、 NDOG-5、增殖細胞核抗原(PCNA),以及一系列整合素(α1、α3、α5、αv 和 β1 亞單位,連同 αvβ3/β5 維特羅內克汀受體)。 該細胞系對巨噬細胞標記物 63/D3、內皮細胞標記物第八因子,以及 α6 和 β4 整合素亞單位呈陰性反應,這證實了其滋養層細胞譜系,並使其有別於巨噬細胞和內皮細胞等其他細胞類型。

HTR-8/SVneo 細胞被廣泛用作研究滋養層細胞侵襲及胎盤生物學的模型,特別是上皮-間質轉化(EMT),這對於胎盤發育過程中滋養層細胞的侵襲行為至關重要。 研究顯示,這些細胞呈現上皮與間質表型的混合群體,並能在標準培養條件下發生上皮-間質轉化(EMT)。 此轉化過程由 TGF-β 訊號傳導介導,該訊號會促進間質表型,其證據在於間質標記物(如維曼汀)的上調,以及上皮標記物(如 E-鈣黏蛋白)的下調。 這使得 HTR-8/SVneo 成為研究滋養層細胞中上皮-間質轉化(EMT)分子機制,及其對正常胎盤發育與妊娠相關疾病影響的寶貴體外模型。

研究進一步證實,HTR-8/SVneo 細胞可形成主要表達上皮標記物的球體。當這些球體轉移至二維培養時,細胞會轉向間質表型,表明上皮-間質轉化過程仍在進行中。 該細胞系的獨特特性,包括其對 TGF-β 的反應性及其上皮-間質混合性質,為滋養層細胞侵襲的複雜細胞動態及胎盤發育的調控提供了關鍵見解,並為研究子癇前症和子宮內生長受限等妊娠相關病理提供了堅實的平台。

Tissue
滋養層、胎盤
Synonyms
  • HTR-8/SV neo
  • HTR-8/SV-neo
  • HTR8/SVneo
  • HTR8svn

02Classification

Organism
Human
Sex
Unspecified
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This human trophoblast cell line (HTR-8/SVneo) contains an SV40 T-Antigen construct introduced by transfection, enabling immortalization of primary trophoblast cells. The insert is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
上皮細胞與間質樣細胞的混合物

04Identifiers

Citation
HTR-8/SVneo(Cytion 型號 305221)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_7162

05Expression and susceptibility

Viruses
猿病毒 40(轉染了含有 SV40 早期區域的 pSV3neo 質體)

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640,含 2.0 mM 穩定谷氨醯胺,含 2.0 g/L NaHCO₃(Cytion 產品編號 820700a)
Incubation atmosphere

37°C,5% CO₂,加濕環境。

Supplements
在培養基中加入 10% 的胎牛血清(FBS)
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
從貼壁細胞中移除舊培養基,並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS,T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著,用 Accutase 完全覆蓋細胞,T25 培養瓶使用 1–2 毫升,T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘,使其脫附。 孵育後,將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮,然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液,將細胞重新懸浮於新鮮培養基中,並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。

為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

Freeze medium
作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
Storage conditions

若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。

Shipping conditions

冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。

08Donor

Donor age
胎齡第6至12週

10Product details

Composition table