HTR-8/SVneo

HTR-8/SVneo - tai žmogaus trofoblasto ląstelių linija, gauta iš pirmojo trimestro placentos chorioninių narelių, ypač iš 6-12 savaičių amžiaus embriono. Šios ląstelės buvo imortalizuotos transfektuojant jas genu, koduojančiu didelį T antigeną, kuris pailgina jų gyvavimo trukmę, tačiau išlaiko ekstravilus invazinio invazinio trofoblasto savybes. Ši ląstelių linija išreiškia keletą pagrindinių su ekstravilus trofoblastu susijusių žymenų, įskaitant į insuliną panašų II augimo faktorių (IGF-II), NDOG-5, proliferuojančių ląstelių branduolio antigeną (PCNA) ir įvairius integrinus (α1, α3, α5, αv ir β1 subvienetai, taip pat αvβ3/β5 vitronektino receptorius). Makrofagų žymeklio 63/D3, endotelio ląstelių žymeklio VIII faktoriaus, α6 ir β4 integrinų subvienetų neigiamas, o tai patvirtina jo trofoblasto liniją ir atskiria jį nuo kitų ląstelių tipų, pavyzdžiui, makrofagų ir endotelio ląstelių.

HTR-8/SVneo ląstelės plačiai naudojamos kaip modelis trofoblastų invazijai ir placentos biologijai tirti, ypač epitelio-mezenchiminiam perėjimui (EMT), kuris yra labai svarbus trofoblastų invaziniam elgesiui placentos vystymosi metu. Tyrimai parodė, kad šios ląstelės pasižymi mišria epitelinių ir mezenchiminių fenotipų populiacija ir gali pereiti EMT standartinėmis kultūros sąlygomis. Šiam perėjimui tarpininkauja TGF-β signalas, kuris skatina mezenchiminį fenotipą, kaip rodo mezenchiminių žymenų, tokių kaip vimentinas, padidėjimas ir epitelinių žymenų, tokių kaip E-kadherinas, sumažėjimas. Todėl HTR-8/SVneo yra vertingas in vitro modelis tiriant molekulinius mechanizmus, lemiančius EMT trofoblastuose, ir jų reikšmę tiek normaliam placentos vystymuisi, tiek su nėštumu susijusiems sutrikimams.

Tyrimai taip pat parodė, kad HTR-8/SVneo ląstelės gali formuoti sferoidus, kuriuose vyrauja epitelio žymenys. Kai šie sferoidai vėl padauginami 2D kultūroje, ląstelės pereina į mezenchiminį fenotipą, o tai rodo vykstantį EMT procesą. Unikalios šios ląstelių linijos savybės, įskaitant jos jautrumą TGF-β ir mišrų epitelinį-mezenchiminį pobūdį, leidžia suprasti sudėtingą trofoblasto invazijos ląstelinę dinamiką ir placentos vystymosi reguliavimą, todėl tai yra patikima platforma su nėštumu susijusioms patologijoms, tokioms kaip preeklampsija ir intrauterininis augimo apribojimas, tirti.

37 °C, 5 %_CO2, drėkintoje atmosferoje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas

Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime