HTR-8/SVneo

HTR-8/SVneo je linie lidských trofoblastických buněk odvozená z choriových klků placenty prvního trimestru, konkrétně z embrya starého 6-12 týdnů. Tyto buňky byly imortalizovány transfekcí genem kódujícím velký T antigen similského viru 40 (SV40), což prodloužilo jejich životnost při zachování vlastností typických pro extravilózní invazivní trofoblasty. Tato buněčná linie exprimuje několik klíčových markerů spojených s extravilózním trofoblastem, včetně inzulinu podobného růstového faktoru II (IGF-II), NDOG-5, proliferujícího buněčného jaderného antigenu (PCNA) a řady integrinů (α1, α3, α5, αv a β1 podjednotky spolu s αvβ3/β5 vitronectinovým receptorem). Je negativní pro makrofágový marker 63/D3, endoteliální buněčný marker faktor VIII a integrinové podjednotky α6 a β4, což potvrzuje jeho trofoblastovou linii a odlišuje ho od jiných buněčných typů, jako jsou makrofágy a endoteliální buňky.

Buňky HTR-8/SVneo jsou široce používány jako model pro studium invaze trofoblastů a biologie placenty, zejména epiteliálně-mezenchymálního přechodu (EMT), který je klíčový pro invazivní chování trofoblastů během vývoje placenty. Výzkum ukázal, že tyto buňky vykazují smíšenou populaci epiteliálních a mezenchymálních fenotypů se schopností podléhat EMT za standardních kultivačních podmínek. Tento přechod je zprostředkován signalizací TGF-β, která podporuje mezenchymální fenotyp, což se projevuje zvýšením regulace mezenchymálních markerů, jako je vimentin, a snížením regulace epiteliálních markerů, jako je E-cadherin. Díky tomu je HTR-8/SVneo cenným in vitro modelem pro studium molekulárních mechanismů, které jsou základem EMT v trofoblastech, a jejich důsledků pro normální vývoj placenty i pro poruchy související s těhotenstvím.

Studie dále prokázaly, že buňky HTR-8/SVneo mohou tvořit sféroidy, které převážně exprimují epiteliální markery. Když jsou tyto sféroidy znovu rozmnoženy ve 2D kultuře, buňky vykazují posun směrem k mezenchymálnímu fenotypu, což naznačuje probíhající proces EMT. Jedinečné vlastnosti této buněčné linie, včetně její reaktivity na TGF-β a její smíšené epiteliálně-mezenchymální povahy, poskytují zásadní vhled do komplexní buněčné dynamiky invaze trofoblastu a regulace vývoje placenty a nabízejí robustní platformu pro zkoumání patologií souvisejících s těhotenstvím, jako je preeklampsie a intrauterinní růstová restrikce.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení