HTR-8/SVneo

HTR-8/SVneo هو سلالة خلايا أرومة غاذية بشرية مشتقة من الزغابات المشيمية للمشيمة في الثلث الأول من الحمل، وتحديداً من جنين عمره من 6 إلى 12 أسبوعاً. وقد تم تخليد هذه الخلايا عن طريق نقل الجين المشفر لمستضد فيروس سيميان 40 (SV40) الكبير T، مما يطيل من عمرها مع الحفاظ على الخصائص النموذجية للأرومة الغاذية الغاذية خارج الخلية. يعبر هذا الخط الخلوي عن العديد من العلامات الرئيسية المرتبطة بالأرومة الغاذية الغاذية خارج الخلية بما في ذلك عامل النمو الشبيه بالأنسولين الثاني (IGF-II)، و NDOG-5، والمستضد النووي للخلايا المتكاثرة (PCNA)، ومجموعة من التكامل (α1، α3، α5، αv، و β1، إلى جانب مستقبلات الفيترونكتين αvβ3/β5). وهي سلبية بالنسبة للعلامة البلعمية الكبيرة 63/D3، وعلامة الخلايا البطانية العامل الثامن للخلية البطانية والعامل الثامن ووحدتي α6 وβ4 الفرعيتين التكاملية الفرعيتين، مما يؤكد سلالتها من الأرومة الغاذية ويميزها عن أنواع الخلايا الأخرى مثل البلاعم والخلايا البطانية.

تُستخدم خلايا HTR-8/SVneo على نطاق واسع كنموذج لدراسة غزو الأرومة الغاذية وبيولوجيا المشيمة، وخاصةً الانتقال من الظهارة إلى الوسيطة اللُّحمية (EMT)، وهو أمر حاسم لسلوك الأرومة الغاذية الغاذية الغاذية أثناء تطور المشيمة. وقد أظهرت الأبحاث أن هذه الخلايا تُظهر مجموعة مختلطة من الأنماط الظاهرية الظهارية والظهارية الوسيطة مع القدرة على الخضوع لعملية الانتقال من الظهارة إلى اللُّحْمَة الوسيطة في ظل ظروف الاستزراع القياسية. يتم هذا الانتقال بوساطة إشارات TGF-β، التي تعزز النمط الظاهري الوسيطة اللُّحْمِيَّة، كما يتضح من التنظيم الأعلى للعلامات الوسيطة اللُّحْمِيَّة، مثل الفيمانتين وتقليل تنظيم العلامات الظهارية مثل E-cadherin. وهذا يجعل من HTR-8/SVneo نموذجاً قيماً في المختبر لدراسة الآليات الجزيئية الكامنة وراء التحول الجزيئي في الأرومة الغاذية وآثاره في كل من النمو الطبيعي للمشيمة والاضطرابات المرتبطة بالحمل.

وقد أظهرت الدراسات كذلك أن خلايا HTR-8/SVneo يمكن أن تُشكّل خلايا أشباه أرومة كروية تعبر في الغالب عن علامات طلائية. وعندما يتم إعادة زرع هذه الأجسام الكروية في مزرعة ثنائية الأبعاد، تُظهر الخلايا تحولاً نحو النمط الظاهري الوسيطة اللُّحْمِيَّة، مما يشير إلى عملية تحول ظاهري مستمر في عملية التحول الخلوي الطلائي. وتوفر الخصائص الفريدة لهذا الخط الخلوي، بما في ذلك استجابته لعامل النمو الظهاري-β وطبيعته المختلطة بين الظهارة والعضل المتوسط، رؤىً مهمة في الديناميكيات الخلوية المعقدة لغزو الأرومة الغاذية وتنظيم تطور المشيمة، مما يوفر منصة قوية لدراسة الأمراض المرتبطة بالحمل مثل تسمم الحمل وتقييد النمو داخل الرحم.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان