HTR-8/SVneo

HTR-8/SVneo เป็นเซลล์ไลน์ของทรอโฟบลาสต์มนุษย์ที่ได้มาจากวิลลัสคอร์ิโอนิกของรกในไตรมาสแรก โดยเฉพาะจากตัวอ่อนอายุ 6 ถึง 12 สัปดาห์ เซลล์เหล่านี้ถูกทำให้เป็นอมตะโดยการถ่ายโอนยีนที่เข้ารหัสแอนติเจน T ขนาดใหญ่ของไวรัสซิมแปนซีไวรัส 40 (SV40) ซึ่งช่วยยืดอายุการใช้งานของเซลล์ในขณะที่ยังคงลักษณะเฉพาะของทรอโฟบลาสต์ชนิดรุกรานนอกวิลลัสเซลล์ไลน์นี้แสดงออกของตัวบ่งชี้สำคัญหลายชนิดที่เกี่ยวข้องกับเซลล์โทรโฟบลาสต์นอกรก (extravillous trophoblasts) ได้แก่ อินซูลินไลค์โกรทแฟคเตอร์ II (IGF-II), NDOG-5, โปรลิเฟอเรติงเซลล์นิวเคลียร์แอนติเจน (PCNA) และอินทิกรินหลากหลายชนิด (α1, α3, α5, αv และ β1 ซับยูนิต รวมถึง αvβ3/β5 vitronectin receptor). ไม่แสดงผลบวกต่อตัวบ่งชี้แมคโครฟาจ 63/D3, ตัวบ่งชี้เซลล์เยื่อบุหลอดเลือด factor VIII, และหน่วยย่อย α6 และ β4 ของ integrin ซึ่งยืนยันถึงสายพันธุ์ของ trophoblast และแยกแยะออกจากเซลล์ประเภทอื่น ๆ เช่น แมคโครฟาจและเซลล์เยื่อบุหลอดเลือด

เซลล์ HTR-8/SVneo ถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายเป็นแบบจำลองในการศึกษาการบุกรุกของโทโกรบลาสต์และชีววิทยาของรก โดยเฉพาะการเปลี่ยนผ่านจากเซลล์เยื่อบุผิวไปเป็นเซลล์เนื้อเยื่อเกี่ยวพัน (EMT) ซึ่งมีความสำคัญอย่างยิ่งต่อพฤติกรรมการบุกรุกของโทโกรบลาสต์ในระหว่างการพัฒนาของรก งานวิจัยแสดงให้เห็นว่าเซลล์เหล่านี้แสดงประชากรผสมของฟีโนไทป์เยื่อบุผิวและเนื้อเยื่อเกี่ยวพัน โดยมีความสามารถในการเกิด EMT ภายใต้สภาวะการเพาะเลี้ยงมาตรฐานการเปลี่ยนแปลงนี้ถูกควบคุมโดยสัญญาณ TGF-β ซึ่งส่งเสริมให้เกิดลักษณะของเซลล์เมเซนไคม์ (mesenchymal phenotype) ตามที่ปรากฏจากการเพิ่มขึ้นของตัวบ่งชี้เมเซนไคม์ เช่น vimentin และการลดลงของตัวบ่งชี้เซลล์เยื่อบุผิว เช่น E-cadherin นี่ทำให้ HTR-8/SVneo เป็นแบบจำลองในหลอดทดลองที่มีคุณค่าสำหรับการศึกษาเชิงกลไกโมเลกุลที่อยู่เบื้องหลังการเปลี่ยนรูปแบบของเซลล์ (EMT) ในเซลล์ทรอโฟบลาสต์ และผลกระทบที่อาจเกิดขึ้นทั้งในกระบวนการพัฒนาของรกปกติและโรคที่เกี่ยวข้องกับการตั้งครรภ์

การศึกษาเพิ่มเติมได้แสดงให้เห็นว่าเซลล์ HTR-8/SVneo สามารถสร้างสเฟียรอยด์ซึ่งแสดงออกของตัวบ่งชี้เยื่อบุผิวเป็นหลัก เมื่อสเฟียรอยด์เหล่านี้ถูกเพาะเลี้ยงใหม่ในวัฒนธรรม 2 มิติ เซลล์จะแสดงการเปลี่ยนแปลงไปสู่ลักษณะของเซลล์เมเซนไคม์ ซึ่งบ่งชี้ถึงกระบวนการ EMT ที่กำลังดำเนินอยู่คุณสมบัติเฉพาะของสายเซลล์นี้ รวมถึงการตอบสนองต่อ TGF-β และลักษณะผสมระหว่างเซลล์เยื่อบุผิวและเซลล์มีเซนไคม์ ให้ข้อมูลเชิงลึกที่สำคัญเกี่ยวกับพลวัตของเซลล์ที่ซับซ้อนในการบุกรุกของโทโรกบลาสต์และการควบคุมการพัฒนาของรก ซึ่งเป็นพื้นฐานที่แข็งแกร่งสำหรับการศึกษาพยาธิสภาพที่เกี่ยวข้องกับการตั้งครรภ์ เช่น ภาวะครรภ์เป็นพิษและการเจริญเติบโตในครรภ์ช้า

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.