HTR-8/SVneo

HTR-8/SVneo on inimese trofoblastide rakuliin, mis on saadud esimese trimestri platsenta koorioni villist, täpsemalt 6-12 nädala vanusest embrüost. Need rakud immortaliseeriti, transfekteerides neid simian virus 40 (SV40) suurt T-antigeeni kodeeriva geeniga, mis pikendab nende eluiga, säilitades samal ajal ekstravillatiivsetele invasiivsetele trofoblastidele iseloomulikud omadused. See rakuliin ekspresseerib mitmeid olulisi ekstravilloosse trofoblastiga seotud markereid, sealhulgas insuliinilaadset II kasvufaktorit (IGF-II), NDOG-5, proliferatsiooniraku tuumaantigeeni (PCNA) ja mitmeid integriine (α1, α3, α5, αv ja β1 allühikuid koos αvβ3/β5 vitronektiiniretseptoriga). See on negatiivne makrofaagimarkeri 63/D3, endoteelirakkude markeri VIII faktori ning α6 ja β4 integriini allühikute suhtes, mis kinnitab selle trofoblastide päritolu ja eristab seda teistest rakutüüpidest, nagu makrofaagid ja endoteelirakud.

HTR-8/SVneo rakke kasutatakse laialdaselt mudelina trofoblastide invasiooni ja platsenta bioloogia, eriti epiteeli-mesenhümaalse ülemineku (EMT) uurimiseks, mis on oluline trofoblastide invasiivse käitumise jaoks platsenta arengu ajal. Uuringud on näidanud, et need rakud on epiteeli ja mesenhüümi fenotüüpide segapopulatsioon, millel on võime läbida EMT standardkultuuritingimustes. Seda üleminekut vahendab TGF-β signaalimine, mis soodustab mesenhüümset fenotüüpi, mida näitab mesenhüümiliste markerite, nagu vimentiin, ülereguleerimine ja epiteelimarkerite, nagu E-kadheriin, allareguleerimine. See muudab HTR-8/SVneo väärtuslikuks in vitro mudeliks, et uurida molekulaarseid mehhanisme, mis on aluseks EMT-le trofoblastides, ja selle mõju nii normaalsele platsenta arengule kui ka rasedusega seotud häiretele.

Lisaks on uuringud näidanud, et HTR-8/SVneo rakud võivad moodustada sferoide, mis väljendavad valdavalt epiteeli markereid. Kui neid sferoide 2D-kultuuris uuesti paljundada, muutuvad rakud mesenhüümse fenotüübi suunas, mis viitab käimasolevale EMT-protsessile. Selle rakuliini ainulaadsed omadused, sealhulgas reageerimine TGF-β-le ja segatud epiteliaalne-mesenhüümiline olemus, annavad olulise ülevaate trofoblastide sissetungi keerulisest rakudünaamikast ja platsenta arengu regulatsioonist, pakkudes tugevat platvormi rasedusega seotud patoloogiate, nagu preeklampsia ja emakasisene kasvupiirang, uurimiseks.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest