HTR-8/SVneo

HTR-8/SVneo, birinci trimester plasentanın koryonik villuslarından, özellikle de 6 ila 12 haftalık embriyodan türetilen bir insan trofoblast hücre hattıdır. Bu hücreler, simian virüs 40 (SV40) büyük T antijenini kodlayan gen ile transfekte edilerek ölümsüzleştirilmiştir, bu da ekstravillöz invaziv trofoblastların tipik özelliklerini korurken yaşam sürelerini uzatır. Bu hücre hattı, insülin benzeri büyüme faktörü II (IGF-II), NDOG-5, çoğalan hücre nükleer antijeni (PCNA) ve bir dizi integrin (α1, α3, α5, αv ve β1 alt birimleri ile αvβ3/β5 vitronektin reseptörü) dahil olmak üzere ekstravillöz trofoblastlarla ilişkili birkaç temel belirteç ifade eder. Makrofaj belirteci 63/D3, endotel hücre belirteci faktör VIII ve α6 ve β4 integrin alt birimleri için negatiftir, bu da trofoblast soyunu doğrular ve makrofajlar ve endotel hücreleri gibi diğer hücre tiplerinden ayırır.

HTR-8/SVneo hücreleri, trofoblast invazyonu ve plasental biyoloji, özellikle de plasental gelişim sırasında trofoblastların invazif davranışı için çok önemli olan epitelyal-mezenkimal geçişi (EMT) incelemek için yaygın olarak kullanılan bir modeldir. Araştırmalar, bu hücrelerin standart kültür koşulları altında EMT'ye uğrama kabiliyetine sahip epitelyal ve mezenkimal fenotiplerden oluşan karışık bir popülasyon sergilediğini göstermiştir. Bu geçişe, vimentin gibi mezenkimal belirteçlerin yukarı regülasyonu ve E-cadherin gibi epitelyal belirteçlerin aşağı regülasyonu ile kanıtlandığı üzere mezenkimal fenotipi destekleyen TGF-β sinyali aracılık eder. Bu da HTR-8/SVneo'yu trofoblastlarda EMT'nin altında yatan moleküler mekanizmaları ve bunun hem normal plasental gelişim hem de gebelikle ilgili bozukluklardaki etkilerini incelemek için değerli bir in vitro model haline getirmektedir.

Çalışmalar ayrıca HTR-8/SVneo hücrelerinin ağırlıklı olarak epitelyal belirteçleri ifade eden sferoidler oluşturabildiğini göstermiştir. Bu sferoidler 2D kültürde yeniden çoğaltıldığında, hücreler mezenkimal fenotipe doğru bir kayma göstererek devam eden bir EMT sürecine işaret etmektedir. Bu hücre hattının TGF-β'ya duyarlılığı ve karışık epitelyal-mezenkimal yapısı gibi benzersiz özellikleri, trofoblast istilasının karmaşık hücresel dinamikleri ve plasental gelişimin düzenlenmesi hakkında kritik bilgiler sağlayarak preeklampsi ve intrauterin büyüme kısıtlaması gibi gebelikle ilgili patolojilerin araştırılması için sağlam bir platform sunmaktadır.

37°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz

Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın