HTR-8/SVneo

HTR-8/SVneo on ihmisen trofoblastisolulinja, joka on peräisin ensimmäisen raskauskolmanneksen istukan, erityisesti 6-12 viikon ikäisen alkion, suonikalvon suonikalvoista. Nämä solut immortalisoitiin transfektoimalla niihin simian virus 40:n (SV40) suurta T-antigeenia koodaava geeni, mikä pidentää niiden elinikää säilyttäen samalla ekstravilloottisille invasiivisille trofoblasteille tyypilliset ominaisuudet. Tämä solulinja ilmentää useita keskeisiä merkkiaineita, jotka liittyvät ekstravilloottisiin trofoblasteihin, kuten insuliinin kaltaista kasvutekijää II (IGF-II), NDOG-5:tä, proliferoivan solun ydinantigeenia (PCNA) ja useita integriinejä (α1-, α3-, α5-, αv- ja β1-alayksiköt sekä αvβ3/β5-vitronektiinireseptori). Se on negatiivinen makrofagimarkkerin 63/D3, endoteelisolumarkkerin tekijä VIII sekä α6- ja β4-integriini-alayksiköiden suhteen, mikä vahvistaa sen trofoblastilinjan ja erottaa sen muista solutyypeistä, kuten makrofageista ja endoteelisoluista.

HTR-8/SVneo-soluja käytetään laajalti mallina trofoblastien invaasion ja istukan biologian tutkimiseen, erityisesti epiteeli-mesenkymaalisen siirtymän (EMT) tutkimiseen, joka on ratkaisevan tärkeää trofoblastien invasiivisen käyttäytymisen kannalta istukan kehityksen aikana. Tutkimukset ovat osoittaneet, että näillä soluilla on epiteelin ja mesenkymaalisen fenotyypin sekapopulaatio, jolla on kyky käydä läpi EMT:tä tavanomaisissa viljelyolosuhteissa. Tätä siirtymää välittää TGF-β-signalointi, joka edistää mesenkymaalista fenotyyppiä, mikä näkyy vimentiinin kaltaisten mesenkymaalisten merkkiaineiden, kuten E-kadheriinin, nousuna ja epiteelin kaltaisten epiteelimerkkiaineiden, kuten E-kadheriinin, laskuina. Tämä tekee HTR-8/SVneosta arvokkaan in vitro -mallin trofoblastien EMT:n taustalla olevien molekyylimekanismien ja sen vaikutusten tutkimiseen sekä istukan normaalissa kehityksessä että raskauteen liittyvissä häiriöissä.

Tutkimukset ovat lisäksi osoittaneet, että HTR-8/SVneo-solut voivat muodostaa sferoideja, jotka ilmentävät pääasiassa epiteelin merkkiaineita. Kun näitä sferoideja kasvatetaan uudelleen 2D-viljelyssä, solut siirtyvät kohti mesenkymaalista fenotyyppiä, mikä viittaa käynnissä olevaan EMT-prosessiin. Tämän solulinjan ainutlaatuiset ominaisuudet, mukaan lukien reagointi TGF-β:hen ja epiteeli-mesenkymaalinen luonne, antavat ratkaisevan tärkeää tietoa trofoblastien invaasion monimutkaisesta soludynamiikasta ja istukan kehityksen säätelystä, mikä tarjoaa vankan alustan raskauteen liittyvien patologioiden, kuten pre-eklampsian ja kohdunsisäisen kasvun rajoittumisen, tutkimiseen.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa