HTR-8/SVneo

HTR-8/SVneo je ľudská trofoblastová bunková línia odvodená z choriových klkov placenty prvého trimestra, konkrétne z embrya vo veku 6 až 12 týždňov. Tieto bunky boli imortalizované transfekciou génom kódujúcim veľký T antigén similského vírusu 40 (SV40), čo predlžuje ich životnosť pri zachovaní vlastností typických pre extravilózny invazívny trofoblast. Táto bunková línia exprimuje niekoľko kľúčových markerov spojených s extravilóznym trofoblastom vrátane inzulínu podobného rastového faktora II (IGF-II), NDOG-5, proliferačného bunkového jadrového antigénu (PCNA) a celého radu integrínov (α1, α3, α5, αv a β1 podjednotky spolu s αvβ3/β5 vitronectínovým receptorom). Je negatívny na makrofágový marker 63/D3, endotelový bunkový marker faktor VIII a integrínovú podjednotku α6 a β4, čo potvrdzuje jeho trofoblastovú líniu a odlišuje ho od iných typov buniek, ako sú makrofágy a endotelové bunky.

Bunky HTR-8/SVneo sa široko používajú ako model na štúdium invázie trofoblastu a biológie placenty, najmä prechodu z epitelu na mezenchým (EMT), ktorý je kľúčový pre invazívne správanie trofoblastu počas vývoja placenty. Výskum ukázal, že tieto bunky vykazujú zmiešanú populáciu epitelových a mezenchymálnych fenotypov so schopnosťou podliehať EMT za štandardných kultivačných podmienok. Tento prechod je sprostredkovaný signalizáciou TGF-β, ktorá podporuje mezenchymálny fenotyp, čo sa prejavuje zvýšením regulácie mezenchymálnych markerov, ako je vimentín, a znížením regulácie epitelových markerov, ako je E-cadherin. Vďaka tomu je HTR-8/SVneo cenným in vitro modelom na štúdium molekulárnych mechanizmov, ktoré sú základom EMT v trofoblaste, a jeho dôsledkov pri normálnom vývoji placenty aj pri poruchách súvisiacich s tehotenstvom.

Štúdie ďalej preukázali, že bunky HTR-8/SVneo môžu tvoriť sféroidy, ktoré prevažne exprimujú epitelové markery. Keď sa tieto sféroidy opätovne rozmnožia v 2D kultúre, bunky vykazujú posun smerom k mezenchymálnemu fenotypu, čo naznačuje prebiehajúci proces EMT. Jedinečné vlastnosti tejto bunkovej línie, vrátane jej reakcie na TGF-β a jej zmiešanej epitelovo-mezenchymálnej povahy, poskytujú kritický pohľad na komplexnú bunkovú dynamiku invázie trofoblastu a reguláciu vývoja placenty, pričom ponúkajú spoľahlivú platformu na skúmanie patologických stavov súvisiacich s tehotenstvom, ako je preeklampsia a vnútromaternicové obmedzenie rastu.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke