HTR-8/SVneo

HTR-8/SVneo ist eine humane Trophoblasten-Zelllinie, die aus den Chorionzotten einer Ersttrimester-Plazenta stammt, und zwar von einem 6 bis 12 Wochen alten Embryo. Diese Zellen wurden durch Transfektion mit dem Gen, das für das große T-Antigen des Simian-Virus 40 (SV40) kodiert, immortalisiert, was ihre Lebensdauer verlängert und gleichzeitig die für extravillöse, invasive Trophoblasten typischen Eigenschaften erhält. Diese Zelllinie exprimiert mehrere Schlüsselmarker, die mit extravillösen Trophoblasten assoziiert sind, darunter den insulinähnlichen Wachstumsfaktor II (IGF-II), NDOG-5, das proliferierende Zellkernantigen (PCNA) und eine Reihe von Integrinen (α1-, α3-, α5-, αv- und β1-Untereinheiten sowie den αvβ3/β5-Vitronectin-Rezeptor). Sie ist negativ für den Makrophagenmarker 63/D3, den Endothelzellmarker Faktor VIII und die α6- und β4-Integrinuntereinheiten, was ihre Trophoblastenabstammung bestätigt und sie von anderen Zelltypen wie Makrophagen und Endothelzellen unterscheidet.

HTR-8/SVneo-Zellen werden häufig als Modell zur Untersuchung der Trophoblasteninvasion und der Biologie der Plazenta verwendet, insbesondere des epithelialen zu mesenchymalen Übergangs (EMT), der für das invasive Verhalten der Trophoblasten während der Entwicklung der Plazenta entscheidend ist. Die Forschung hat gezeigt, dass diese Zellen eine gemischte Population von epithelialen und mesenchymalen Phänotypen aufweisen, die unter Standardkulturbedingungen eine EMT durchlaufen können. Dieser Übergang wird durch TGF-β-Signale vermittelt, die den mesenchymalen Phänotyp fördern, was durch die Hochregulierung von mesenchymalen Markern wie Vimentin und die Herunterregulierung von epithelialen Markern wie E-Cadherin belegt wird. Dies macht HTR-8/SVneo zu einem wertvollen In-vitro-Modell für die Untersuchung der molekularen Mechanismen, die der EMT in Trophoblasten zugrunde liegen, und ihrer Auswirkungen sowohl auf die normale Entwicklung der Plazenta als auch auf schwangerschaftsbedingte Störungen.

Studien haben außerdem gezeigt, dass HTR-8/SVneo-Zellen Sphäroide bilden können, die überwiegend epitheliale Marker exprimieren. Wenn diese Sphäroide in einer 2D-Kultur erneut vermehrt werden, zeigen die Zellen eine Verschiebung hin zu einem mesenchymalen Phänotyp, was auf einen laufenden EMT-Prozess hindeutet. Die einzigartigen Eigenschaften dieser Zelllinie, einschließlich ihrer Empfindlichkeit gegenüber TGF-β und ihrer gemischten epithelialen und mesenchymalen Beschaffenheit, bieten entscheidende Einblicke in die komplexe zelluläre Dynamik der Trophoblasteninvasion und die Regulierung der Plazentaentwicklung und bieten eine robuste Plattform für die Untersuchung schwangerschaftsbedingter Pathologien wie Präeklampsie und intrauterine Wachstumsrestriktion.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung