MB49

La lignée cellulaire MB49 est un modèle murin dérivé de cellules épithéliales de la vessie de la souris C57BL/6. Elle a été initialement mise au point pour étudier le cancer de la vessie, offrant ainsi une plateforme permettant d’examiner les caractéristiques biologiques et moléculaires du carcinome urothélial. La lignée cellulaire a été établie par induction chimique de tumeurs de la vessie à l’aide du carcinogène 7,12-diméthylbenz[a]anthracène (DMBA), comme le détaillent les premières études de recherche. Les cellules MB49 présentent un phénotype tumorigène lorsqu’elles sont transplantées chez des souris syngéniques, formant ainsi des carcinomes urothéliaux. Ces tumeurs sont souvent peu différenciées et peuvent présenter des morphologies mixtes, comprenant des cellules fusiformes et des zones adénocarcinomateuses, qui ressemblent à des sous-types agressifs de cancer de la vessie observés en pathologie humaine.

Des recherches plus approfondies ont conduit au développement de la souche MB49-I, une sous-lignée plus invasive de la souche MB49. Cette sous-lignée a été générée après 13 passages in vivo consécutifs, ce qui a renforcé son potentiel invasif et métastatique. Les cellules MB49-I présentent une activité protéolytique accrue, notamment en ce qui concerne des enzymes telles que la cathepsine B, la métalloprotéinase matricielle 9 (MMP-9) et l’activateur du plasminogène de type urokinase (uPA). Ces enzymes contribuent à la dégradation des composants de la matrice extracellulaire, facilitant ainsi l’invasion et la métastase des cellules tumorales. Lorsqu’elle est inoculée par voie orthotopique dans la vessie de souris syngéniques, la sous-lignée MB49-I entraîne la formation de tumeurs vésicales hautement invasives, ce qui en fait un modèle précieux pour l’étude de la progression tumorale et l’évaluation de traitements anticancéreux visant à prévenir l’invasion et les métastases.

Ce modèle MB49, y compris la variante MB49-I, joue un rôle essentiel dans la compréhension des mécanismes moléculaires sous-jacents à la progression du cancer de la vessie et dans l’élaboration de nouvelles stratégies thérapeutiques. Le modèle reproduit fidèlement le cancer de la vessie chez l’humain, notamment par sa capacité à simuler les caractéristiques invasives et métastatiques de la maladie, offrant ainsi un système robuste pour les études précliniques.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.