MB49

La linea cellulare MB49 è un modello murino derivato dalle cellule epiteliali della vescica del topo C57BL/6. È stata originariamente sviluppata per studiare il cancro della vescica, fornendo una piattaforma per esaminare le caratteristiche biologiche e molecolari del carcinoma uroteliale. La linea cellulare è stata creata attraverso l'induzione chimica di tumori della vescica utilizzando l'agente cancerogeno 7,12-dimetilbenz[a] antracene (DMBA), come descritto nei primi studi di ricerca. Le cellule MB49 presentano un fenotipo tumorigenico quando vengono trapiantate in topi singenici, formando carcinomi uroteliali. Questi tumori sono spesso scarsamente differenziati e possono presentare morfologie miste, tra cui cellule a forma di fuso e aree adenocarcinomatose, che assomigliano a sottotipi aggressivi di cancro della vescica osservati nella patologia umana.

Ulteriori ricerche hanno portato allo sviluppo di MB49-I, una sublinea più invasiva di MB49. Questa sublinea è stata generata dopo 13 passaggi consecutivi in vivo, aumentando il suo potenziale invasivo e metastatico. Le cellule MB49-I presentano una maggiore attività proteolitica, in particolare di enzimi come la catepsina B, la metalloproteinasi di matrice 9 (MMP-9) e l'attivatore del plasminogeno di tipo urochinasi (uPA). Questi enzimi contribuiscono alla rottura dei componenti della matrice extracellulare, facilitando l'invasione e la metastasi delle cellule tumorali. La sublinea MB49-I, quando viene inoculata ortotopicamente nella vescica di topi singenici, porta alla formazione di tumori vescicali altamente invasivi, rendendola un modello prezioso per lo studio della progressione tumorale e per la sperimentazione di terapie antitumorali volte a prevenire l'invasione e le metastasi.

Il modello MB49, compresa la variante MB49-I, è fondamentale per comprendere i meccanismi molecolari alla base della progressione del tumore della vescica e per sviluppare nuove strategie terapeutiche. Il modello imita da vicino il cancro alla vescica umano, in particolare per la sua capacità di simulare le caratteristiche invasive e metastatiche della malattia, fornendo così un sistema robusto per gli studi preclinici.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia