Ga naar de inhoud
MB49
Weefsel
Urineblaas
Ziekte
Blaas transitional cell carcinoma bij de muis
Synoniemen
MB-49

Documenten

MB49

Cell line · Productnummer 305240

€600.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De MB49 cellijn is een muismodel afgeleid van de blaasepitheelcellen van de C57BL/6 muis. De lijn werd oorspronkelijk ontwikkeld om blaaskanker te bestuderen en biedt een platform om de biologische en moleculaire kenmerken van urotheelcarcinomen te onderzoeken. De cellijn is ontstaan door chemische inductie van blaastumoren met behulp van het kankerverwekkende 7,12-dimethylbenz[a]anthraceen (DMBA), zoals beschreven in vroege onderzoeken. MB49 cellen vertonen een tumorigene fenotype wanneer ze getransplanteerd worden in syngene muizen, waarbij ze urotheliale carcinomen vormen. Deze tumoren zijn vaak slecht gedifferentieerd en kunnen een gemengde morfologie vertonen, waaronder spoelvormige cellen en adenocarcinomateuze gebieden, die lijken op agressieve blaaskankersubtypes die in de menselijke pathologie worden gezien.

Verder onderzoek heeft geleid tot de ontwikkeling van MB49-I, een meer invasieve sublijn van MB49. Deze sublijn werd gegenereerd na 13 opeenvolgende in vivo passages, waardoor het invasieve en metastatische potentieel werd vergroot. MB49-I cellen vertonen een verhoogde proteolytische activiteit, met name enzymen zoals cathepsine B, matrix metalloproteïnase 9 (MMP-9) en urokinase-type plasminogeen activator (uPA). Deze enzymen dragen bij aan de afbraak van extracellulaire matrixcomponenten, waardoor de invasie en metastase van tumorcellen wordt bevorderd. Wanneer de MB49-I subline orthotopisch wordt geïnoculeerd in de blaas van syngene muizen, leidt dit tot de vorming van zeer invasieve blaastumoren, waardoor het een waardevol model is voor het bestuderen van tumorgroei en het testen van antikankertherapieën gericht op het voorkomen van invasie en metastase.

Dit MB49 model, inclusief de MB49-I variant, is essentieel voor het begrijpen van de moleculaire mechanismen die ten grondslag liggen aan de progressie van blaaskanker en voor het ontwikkelen van nieuwe therapeutische strategieën. Het model bootst blaaskanker bij de mens goed na, met name wat betreft het vermogen om de invasieve en metastatische kenmerken van de ziekte te simuleren, waardoor een robuust systeem voor preklinisch onderzoek ontstaat.

Weefsel
Urineblaas
Ziekte
Blaas transitional cell carcinoma bij de muis
Synoniemen
  • MB-49

02Classificatie

Organisme
Muis
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheel
Karyotype
Heeft chromosoom Y verloren

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
MB49 (Cytion catalogusnummer 305240)
NCBI-belastingnummer
10090
Cellosaurus
CVCL_7076

05Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

07Donateur

Soort / ondersoort
C57BL/ICRF-a(t)
Leeftijd van de donor
Volwassen

09Productgegevens

Overzichtstabel