Skip to content
MB49
Tissue
שלפוחית השתן
Disease
קרצינומה של תאי המעבר בשלפוחית השתן בעכבר
Synonyms
MB-49

Documents

MB49

Cell line · Product number 305240

US$550.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

קו התאים MB49 הוא מודל עכברי שמקורו בתאי האפיתל של שלפוחית השתן של עכבר C57BL/6. הוא פותח במקור כדי לחקור סרטן שלפוחית השתן, ומספק פלטפורמה לבחינת המאפיינים הביולוגיים והמולקולריים של קרצינומה של שלפוחית השתן. קו התאים הוקם באמצעות אינדוקציה כימית של גידולים בשלפוחית השתן באמצעות החומר המסרטן 7,12-dimethylbenz[a]anthracene (DMBA), כפי שתואר במחקרים מוקדמים. תאי MB49 מפגינים פנוטיפ טומורגני כאשר הם מושתלים בעכברים סינגניים, ויוצרים קרצינומות של שלפוחית השתן. גידולים אלה לרוב אינם מובחנים היטב ויכולים להפגין מורפולוגיות מעורבות, כולל תאים בצורת ציר ואזורים אדנוקרצינומטיים, הדומים לסוגים אגרסיביים של סרטן שלפוחית השתן הנראים בפתולוגיה אנושית.

מחקרים נוספים הובילו לפיתוח MB49-I, תת-קו פולשני יותר של MB49. תת-קו זה נוצר לאחר 13 מעברים רצופים in vivo, מה שהגביר את הפוטנציאל הפולשני והגרורתי שלו. תאי MB49-I מפגינים פעילות פרוטאוליטית מוגברת, במיוחד באנזימים כגון קטפסין B, מטריקס מטאלופרוטאינז 9 (MMP-9) ומפעיל פלסמינוגן מסוג אורוקינאז (uPA). אנזימים אלה תורמים לפירוק רכיבי המטריקס החוץ-תאי, ומסייעים לפלישה ולגרורות של תאי הגידול. תת-קו MB49-I, כאשר הוא מוחדר באופן אורתוטופי לשלפוחית השתן של עכברים סינגניים, מוביל להיווצרות גידולים פולשניים ביותר בשלפוחית השתן, מה שהופך אותו למודל חשוב לחקר התקדמות הגידול ולבדיקת טיפולים אנטי-סרטניים שמטרתם למנוע פלישה וגרורות.

מודל MB49 זה, כולל וריאנט MB49-I, מסייע בהבנת המנגנונים המולקולריים העומדים בבסיס התקדמות סרטן שלפוחית השתן ובפיתוח אסטרטגיות טיפוליות חדשות. המודל מדמה באופן מדויק את סרטן שלפוחית השתן האנושי, במיוחד ביכולתו לדמות את המאפיינים הפולשניים והגרורתיים של המחלה, ובכך מספק מערכת איתנה למחקרים פרה-קליניים.

Tissue
שלפוחית השתן
Disease
קרצינומה של תאי המעבר בשלפוחית השתן בעכבר
Synonyms
  • MB-49

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
אפיתל
Karyotype
איבד את כרומוזום Y

04Identifiers

Citation
MB49 (מספר קטלוגי Cytion 305240)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_7076

05Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

07Donor

Breed / subspecies
C57BL/ICRF-a(t)
Donor age
מבוגר

09Product details

Composition table