Gå direkte til indholdet
MB49
Væv
Urinblæren
Sygdom
Overgangscellekarcinom i museblære
Synonymer
MB-49

Dokumenter

MB49

Cell line · Varenummer 305240

€600.00ekskl. moms og fragt
På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

MB49-cellelinjen er en murin model, der stammer fra C57BL/6-musens blæreepitelceller. Den blev oprindeligt udviklet til at studere blærekræft og udgør en platform til at undersøge de biologiske og molekylære egenskaber ved urothelial carcinoma. Cellelinjen blev etableret gennem kemisk induktion af blæretumorer ved hjælp af det kræftfremkaldende stof 7,12-dimethylbenz[a]anthracen (DMBA), som beskrevet i tidlige forskningsstudier. MB49-celler udviser en tumorigenisk fænotype, når de transplanteres til syngene mus og danner urotheliale karcinomer. Disse tumorer er ofte dårligt differentierede og kan udvise blandede morfologier, herunder spindelformede celler og adenokarcinomatøse områder, som ligner aggressive undertyper af blærekræft, der ses i humanpatologi.

Yderligere forskning har ført til udviklingen af MB49-I, en mere invasiv sublinje af MB49. Denne sublinje blev genereret efter 13 på hinanden følgende in vivo-passager, hvilket forbedrede dens invasive og metastatiske potentiale. MB49-I-celler udviser øget proteolytisk aktivitet, især i enzymer som cathepsin B, matrix metalloproteinase 9 (MMP-9) og urokinase-type plasminogenaktivator (uPA). Disse enzymer bidrager til nedbrydningen af ekstracellulære matrixkomponenter, hvilket letter invasionen og metastaseringen af tumorceller. Når MB49-I-sublinjen inokuleres ortotopisk i blæren på syngene mus, fører det til dannelse af meget invasive blæretumorer, hvilket gør den til en værdifuld model til undersøgelse af tumorprogression og testning af kræftbehandlinger, der har til formål at forhindre invasion og metastase.

Denne MB49-model, herunder MB49-I-varianten, er afgørende for at forstå de molekylære mekanismer, der ligger til grund for udviklingen af blærekræft, og for at udvikle nye behandlingsstrategier. Modellen efterligner i høj grad blærekræft hos mennesker, især i dens evne til at simulere sygdommens invasive og metastatiske egenskaber, hvilket giver et robust system til prækliniske undersøgelser.

Væv
Urinblæren
Sygdom
Overgangscellekarcinom i museblære
Synonymer
  • MB-49

02Klassificering

Organisme
Mus
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitelial
Karyotype
Har mistet kromosom Y

04Identifikatorer

Kildehenvisning
MB49 (Cytion katalognummer 305240)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_7076

05Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukose, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

07Donor

Race / underart
C57BL/ICRF-a(t)
Donorens alder
Voksen

09Produktoplysninger

Sammensætningstabel