Gå direkt till innehållet
MB49
Vävnad
Urinblåsa
Sjukdom
Övergångscellscarcinom i musens urinblåsa
Synonymer
MB-49

MB49

Cell line · Produktnummer 305240

€600.00exkl. moms och frakt
Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

MB49-cellinjen är en murin modell som härrör från C57BL/6-musens epitelceller i urinblåsan. Den utvecklades ursprungligen för att studera cancer i urinblåsan och utgör en plattform för att undersöka de biologiska och molekylära egenskaperna hos uroteliala karcinom. Cellinjen etablerades genom kemisk induktion av tumörer i urinblåsan med hjälp av det cancerframkallande ämnet 7,12-dimetylbenz[a]antracen (DMBA), vilket beskrivs i tidiga forskningsstudier. MB49-celler uppvisar en tumörframkallande fenotyp när de transplanteras till syngena möss och bildar uroteliala karcinom. Dessa tumörer är ofta dåligt differentierade och kan uppvisa blandade morfologier, inklusive spindelformade celler och adenocarcinomatösa områden, som liknar aggressiva subtyper av blåscancer som ses i humanpatologin.

Ytterligare forskning har lett till utvecklingen av MB49-I, en mer invasiv sublinje av MB49. Denna sublinje genererades efter 13 på varandra följande in vivo-passager, vilket förstärkte dess invasiva och metastatiska potential. MB49-I-celler uppvisar ökad proteolytisk aktivitet, särskilt i enzymer som cathepsin B, matrix metalloproteinas 9 (MMP-9) och plasminogenaktivator av urokinas-typ (uPA). Dessa enzymer bidrar till nedbrytningen av extracellulära matriskomponenter, vilket underlättar invasion och metastasering av tumörceller. När MB49-I sublinjen inokuleras ortotopiskt i urinblåsan hos syngena möss leder det till bildandet av mycket invasiva tumörer i urinblåsan, vilket gör den till en värdefull modell för att studera tumörutveckling och testa cancerläkemedel som syftar till att förhindra invasion och metastasering.

MB49-modellen, inklusive varianten MB49-I, är viktig för att förstå de molekylära mekanismer som ligger bakom utvecklingen av cancer i urinblåsan och för att utveckla nya behandlingsstrategier. Modellen efterliknar blåscancer hos människa, framför allt genom sin förmåga att simulera sjukdomens invasiva och metastaserande egenskaper, och utgör därmed ett robust system för prekliniska studier.

Vävnad
Urinblåsa
Sjukdom
Övergångscellscarcinom i musens urinblåsa
Synonymer
  • MB-49

02Klassificering

Organism
Mus
Kön
Man
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelial
Karyotyp
Har förlorat kromosom Y

04Identifierare

Källa
MB49 (Cytion katalognummer 305240)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_7076

05Hantering och odling

Odlingsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukos, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

07Donator

Ras / underart
C57BL/ICRF-a(t)
Donatorns ålder
Vuxen

09Produktinformation

Sammansättningstabell