Tartalomra ugrás
MB49
Szövet
Húgyhólyag
Betegség
Egér hólyag átmeneti sejtes karcinóma
Szinonimák
MB-49

Dokumentumok

MB49

Cell line · Termékszám 305240

€600.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

Az MB49 sejtvonal egy egérmodell, amely a C57BL/6 egér hólyaghámsejtjeiből származik. Eredetileg a hólyagrák tanulmányozására fejlesztették ki, platformot biztosítva az urotheliális karcinóma biológiai és molekuláris jellemzőinek vizsgálatához. A sejtvonalat hólyagtumorok kémiai indukciójával hozták létre a 7,12-dimetilbenz[a]antracén (DMBA) karcinogénnel, ahogyan azt a korai kutatások részletezték. Az MB49 sejtek tumorigén fenotípust mutatnak, amikor szinogén egerekbe transzplantálják őket, urothelialis karcinómákat képezve. Ezek a daganatok gyakran gyengén differenciáltak és vegyes morfológiát mutathatnak, beleértve az orsó alakú sejteket és az adenokarcinomatosus területeket, amelyek hasonlítanak a humán patológiában megfigyelhető agresszív hólyagrák altípusokra.

A további kutatások az MB49-I, az MB49 invazívabb alvonalának kifejlesztéséhez vezettek. Ezt az alvonalat 13 egymást követő in vivo passzázs után hozták létre, fokozva az invazív és metasztatikus potenciált. Az MB49-I sejtek fokozott proteolitikus aktivitást mutatnak, különösen az olyan enzimek tekintetében, mint a kathepszin B, a mátrix metalloproteináz 9 (MMP-9) és az urokináz típusú plazminogén-aktivátor (uPA). Ezek az enzimek hozzájárulnak az extracelluláris mátrix összetevőinek lebontásához, elősegítve a tumorsejtek invázióját és metasztázisát. Az MB49-I alvonal ortotópikusan szingénikus egerek hólyagjába oltva erősen invazív hólyagdaganatok kialakulásához vezet, így értékes modell a tumorprogresszió tanulmányozására és az invázió és metasztázis megelőzésére irányuló rákellenes terápiák tesztelésére.

Ez az MB49 modell, beleértve az MB49-I változatot is, fontos szerepet játszik a hólyagrák progressziójának hátterében álló molekuláris mechanizmusok megértésében és új terápiás stratégiák kifejlesztésében. A modell szorosan utánozza a humán hólyagrákot, különösen a betegség invazív és metasztatikus jellemzőinek szimulálására való képességét illetően, ezáltal robusztus rendszert biztosít a preklinikai vizsgálatokhoz.

Szövet
Húgyhólyag
Betegség
Egér hólyag átmeneti sejtes karcinóma
Szinonimák
  • MB-49

02Osztályozás

Organizmus
Egér
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelialis
Kariotípus
Elvesztette az Y kromoszómát

04Azonosítók

Hivatkozás
MB49 (Cytion katalógusszám: 305240)
NCBI adóazonosító szám
10090
Cellosaurus
CVCL_7076

05Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM, w: 4,5 g/L glükóz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM nátrium-piruvát (Cytion cikkszám 820300a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

07Adományozó

Faj / alfaj
C57BL/ICRF-a(t)
Az adományozó életkora
Felnőtt

09Termékadatok

Összetételi táblázat