Pereiti prie turinio
MB49
Audinys
Šlapimo pūslė
Liga
Pelės šlapimo pūslės pereinamųjų ląstelių karcinoma
Sinonimai
MB-49

Dokumentai

MB49

Cell line · Prekės numeris 305240

€600.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

MB49 ląstelių linija yra pelės modelis, gautas iš C57BL/6 pelės šlapimo pūslės epitelio ląstelių. Iš pradžių ji buvo sukurta šlapimo pūslės vėžiui tirti ir tapo platforma, leidžiančia tirti šlapimo pūslės karcinomos biologines ir molekulines savybes. Ląstelių linija buvo sukurta cheminiu būdu indukuojant šlapimo pūslės navikus kancerogenu 7,12-dimetilbenz[a]antracenu (DMBA), kaip išsamiai aprašyta ankstyvuosiuose moksliniuose tyrimuose. MB49 ląstelės pasižymi navikiniu fenotipu, kai yra persodinamos sinogeninėms pelėms ir suformuoja urotelio karcinomas. Šie navikai dažnai būna prastai diferencijuoti ir gali pasižymėti mišria morfologija, įskaitant verpstės formos ląsteles ir adenokarcinomatozines sritis, kurios primena agresyvius šlapimo pūslės vėžio potipius, aptinkamus žmogaus patologijoje.

Tolesnių tyrimų metu buvo sukurta MB49-I, invazyvesnė MB49 pakraipa. Ši sublinija buvo sukurta po 13 iš eilės in vivo perėjimų, padidinant jos invazinį ir metastazinį potencialą. MB49-I ląstelėms būdingas padidėjęs proteolitinis aktyvumas, ypač tokių fermentų kaip katepsinas B, matrikso metaloproteinazė 9 (MMP-9) ir urokinazės tipo plazminogeno aktyvatorius (uPA). Šie fermentai padeda skaidyti ekstraląstelinio matrikso komponentus ir palengvina navikinių ląstelių invaziją bei metastazavimą. MB49-I sublinija, ortotopiškai inokuliavus į sinogeninių pelių šlapimo pūslę, suformuoja labai invazinius šlapimo pūslės navikus, todėl ji yra vertingas modelis naviko progresavimui tirti ir priešvėžiniams vaistams, kuriais siekiama užkirsti kelią invazijai ir metastazėms, išbandyti.

Šis MB49 modelis, įskaitant MB49-I variantą, padeda suprasti molekulinius mechanizmus, kuriais grindžiamas šlapimo pūslės vėžio progresavimas, ir kurti naujas gydymo strategijas. Šis modelis tiksliai atkartoja žmogaus šlapimo pūslės vėžį, ypač gebėdamas imituoti invazinius ir metastazinius ligos požymius, todėl yra patikima ikiklinikinių tyrimų sistema.

Audinys
Šlapimo pūslė
Liga
Pelės šlapimo pūslės pereinamųjų ląstelių karcinoma
Sinonimai
  • MB-49

02Klasifikacija

Organizmas
Pele
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Epitelis
Kariotipas
Prarado Y chromosomą

04Identifikatoriai

Nuoroda
MB49 (Cytion katalogo numeris 305240)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
10090
Cellosaurus
CVCL_7076

05Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM, š: 4,5 g/l gliukozės, š: 4 mM L-glutamino, š: 3,7 g/l NaHCO3, š: 1,0 mM natrio piruvato (Cytion gaminio numeris 820300a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

07Donoras

Veislė / porūšis
C57BL/ICRF-a(t)
Donoro amžius
Suaugusiųjų

09Produkto aprašymas

Sudėties lentelė