Премини към съдържанието
MB49
Тъкан
Пикочен мехур
Заболяване
Преходноклетъчен карцином на пикочния мехур при мишки
Синоними
MB-49

Документи

MB49

Cell line · Номер на продукта 305240

€600.00без ДДС и доставка
На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия MB49 е миши модел, получен от епителните клетки на пикочния мехур на мишка C57BL/6. Първоначално е разработена за изследване на рака на пикочния мехур, като предоставя платформа за изследване на биологичните и молекулярните характеристики на уротелиалния карцином. Клетъчната линия е създадена чрез химическо индуциране на тумори на пикочния мехур с помощта на канцерогена 7,12-диметилбенз[а]антрацен (DMBA), както е описано подробно в ранните изследователски проучвания. Клетките MB49 проявяват туморогенен фенотип, когато се трансплантират в сингенни мишки, образувайки уротелиални карциноми. Тези тумори често са слабо диференцирани и могат да показват смесена морфология, включително вретеновидни клетки и аденокарциноматозни области, които наподобяват агресивни подтипове на рак на пикочния мехур, наблюдавани в човешката патология.

По-нататъшните изследвания доведоха до разработването на MB49-I, по-инвазивна подлиния на MB49. Тази подлиния е създадена след 13 последователни пасажи in vivo, което увеличава нейния инвазивен и метастатичен потенциал. Клетките MB49-I показват повишена протеолитична активност, особено при ензими като катепсин В, матриксна металопротеиназа 9 (MMP-9) и плазминогенен активатор от урокиназен тип (uPA). Тези ензими допринасят за разграждането на компонентите на извънклетъчния матрикс, като улесняват инвазията и метастазирането на туморните клетки. Подлинията MB49-I, когато се инокулира ортотопично в пикочния мехур на сингенни мишки, води до образуване на силно инвазивни тумори на пикочния мехур, което я прави ценен модел за изучаване на туморната прогресия и тестване на противоракови терапии, насочени към предотвратяване на инвазията и метастазирането.

Този модел MB49, включително вариантът MB49-I, е от съществено значение за разбирането на молекулярните механизми, които са в основата на прогресията на рака на пикочния мехур, и за разработването на нови терапевтични стратегии. Моделът наподобява в голяма степен човешкия рак на пикочния мехур, особено по отношение на способността му да симулира инвазивните и метастатичните характеристики на заболяването, като по този начин осигурява надеждна система за предклинични изследвания.

Тъкан
Пикочен мехур
Заболяване
Преходноклетъчен карцином на пикочния мехур при мишки
Синоними
  • MB-49

02Класификация

Организъм
Мишка
Секс
Мъж
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Епителиален
Кариотип
Загубил е хромозома Y

04Идентификатори

Източник
MB49 (каталожен номер 305240 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
10090
Целозавър
CVCL_7076

05Обработка и отглеждане

Хранителна среда
DMEM, w: 4,5 g/L глюкоза, w: 4 mM L-глутамин, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM натриев пируват (номер на изделието на Cytion 820300a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

07Дарител

Порода / подвид
C57BL/ICRF-a(t)
Възраст на донора
Възрастни

09Подробности за продукта

Таблица със състава