Μετάβαση στο περιεχόμενο
MB49
Ιστός
Ουροδόχος κύστη
Ασθένεια
Καρκίνωμα μεταβατικών κυττάρων ουροδόχου κύστης ποντικού
Συνώνυμα
MB-49

Έγγραφα

MB49

Cell line · Αριθμός προϊόντος 305240

€600.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής
Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η κυτταρική σειρά MB49 είναι ένα μοντέλο ποντικού που προέρχεται από τα επιθηλιακά κύτταρα της ουροδόχου κύστης του ποντικού C57BL/6. Αναπτύχθηκε αρχικά για τη μελέτη του καρκίνου της ουροδόχου κύστης, παρέχοντας μια πλατφόρμα για την εξέταση των βιολογικών και μοριακών χαρακτηριστικών του ουροθηλιακού καρκινώματος. Η κυτταρική σειρά δημιουργήθηκε μέσω της χημικής επαγωγής όγκων της ουροδόχου κύστης με τη χρήση του καρκινογόνου 7,12-διμεθυλοβενζ[α]ανθρακενίου (DMBA), όπως περιγράφεται λεπτομερώς σε πρώιμες ερευνητικές μελέτες. Τα κύτταρα MB49 εμφανίζουν καρκινικό φαινότυπο όταν μεταμοσχεύονται σε συνγονιδιακά ποντίκια, σχηματίζοντας ουροθηλιακά καρκινώματα. Αυτοί οι όγκοι είναι συχνά ελάχιστα διαφοροποιημένοι και μπορούν να εμφανίσουν μικτή μορφολογία, συμπεριλαμβανομένων ατρακτοειδών κυττάρων και αδενοκαρκινωματικών περιοχών, οι οποίες μοιάζουν με επιθετικούς υποτύπους καρκίνου της ουροδόχου κύστης που παρατηρούνται στην ανθρώπινη παθολογία.

Περαιτέρω έρευνα οδήγησε στην ανάπτυξη του MB49-I, μιας πιο επεμβατικής υποκατηγορίας του MB49. Αυτή η υποκατηγορία δημιουργήθηκε μετά από 13 διαδοχικά in vivo περάσματα, ενισχύοντας το επεμβατικό και μεταστατικό δυναμικό της. Τα κύτταρα MB49-I παρουσιάζουν αυξημένη πρωτεολυτική δραστηριότητα, ιδίως σε ένζυμα όπως η καθεψίνη Β, η μεταλλοπρωτεϊνάση της μήτρας 9 (MMP-9) και ο ενεργοποιητής πλασμινογόνου τύπου ουροκινάσης (uPA). Τα ένζυμα αυτά συμβάλλουν στη διάσπαση των συστατικών της εξωκυτταρικής μήτρας, διευκολύνοντας την εισβολή και τη μετάσταση των καρκινικών κυττάρων. Η υποκατηγορία MB49-I, όταν εμβολιάζεται ορθοτοπικά στην ουροδόχο κύστη συγγενών ποντικών, οδηγεί στο σχηματισμό εξαιρετικά διεισδυτικών όγκων της ουροδόχου κύστης, γεγονός που την καθιστά πολύτιμο μοντέλο για τη μελέτη της εξέλιξης του όγκου και τη δοκιμή αντικαρκινικών θεραπευτικών ουσιών που αποσκοπούν στην πρόληψη της διείσδυσης και της μετάστασης.

Αυτό το μοντέλο MB49, συμπεριλαμβανομένης της παραλλαγής MB49-I, είναι καθοριστικής σημασίας για την κατανόηση των μοριακών μηχανισμών που διέπουν την εξέλιξη του καρκίνου της ουροδόχου κύστης και για την ανάπτυξη νέων θεραπευτικών στρατηγικών. Το μοντέλο μιμείται στενά τον ανθρώπινο καρκίνο της ουροδόχου κύστης, ιδίως όσον αφορά την ικανότητά του να προσομοιώνει τα διεισδυτικά και μεταστατικά χαρακτηριστικά της νόσου, παρέχοντας έτσι ένα ισχυρό σύστημα για προκλινικές μελέτες.

Ιστός
Ουροδόχος κύστη
Ασθένεια
Καρκίνωμα μεταβατικών κυττάρων ουροδόχου κύστης ποντικού
Συνώνυμα
  • MB-49

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Ποντίκι
Σεξ
Άνδρας
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Επιθηλιακό
Καρυότυπος
Έχει χάσει το χρωμόσωμα Υ

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
MB49 (αριθμός καταλόγου Cytion 305240)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
10090
Κελλοσαύρος
CVCL_7076

05Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
DMEM, w: 4,5 g/L γλυκόζη, w: 4 mM L-γλουταμίνη, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM πυρουβικό νάτριο (αριθμός άρθρου Cytion 820300a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

07Δωρητής

Φυλή / υποείδος
C57BL/ICRF-a(t)
Ηλικία δωρητή
Ενηλίκων

09Λεπτομέρειες προϊόντος

Πίνακας σύνθεσης