
- Tecido
- Bexiga urinária
- Doença
- Carcinoma de células de transição da bexiga de ratinho
- Sinónimos
- MB-49
Documentos
MB49
Cell line · Número do produto 305240
Personalização / Recomendações
- MB49Cell line€600.00
Recomendado (lote mais recente)
01Informações gerais
- Descrição
A linha celular MB49 é um modelo murino derivado das células epiteliais da bexiga do rato C57BL/6. Foi originalmente desenvolvida para estudar o cancro da bexiga, proporcionando uma plataforma para examinar as caraterísticas biológicas e moleculares do carcinoma urotelial. A linha de células foi estabelecida através da indução química de tumores da bexiga utilizando o carcinogéneo 7,12-dimetilbenz[a]antraceno (DMBA), tal como descrito nos primeiros estudos de investigação. As células MB49 apresentam um fenótipo tumorigénico quando transplantadas para ratinhos singénicos, formando carcinomas uroteliais. Estes tumores são frequentemente pouco diferenciados e podem apresentar morfologias mistas, incluindo células fusiformes e áreas adenocarcinomatosas, que se assemelham a subtipos agressivos de cancro da bexiga observados na patologia humana.
Outras investigações levaram ao desenvolvimento da MB49-I, uma sub-linha mais invasiva da MB49. Esta sub-linha foi gerada após 13 passagens in vivo consecutivas, aumentando o seu potencial invasivo e metastático. As células MB49-I apresentam uma maior atividade proteolítica, particularmente em enzimas como a catepsina B, a metaloproteinase 9 da matriz (MMP-9) e o ativador do plasminogénio do tipo uroquinase (uPA). Estas enzimas contribuem para a degradação dos componentes da matriz extracelular, facilitando a invasão e a metástase das células tumorais. A sub-linhagem MB49-I, quando inoculada ortotopicamente na bexiga de ratinhos singénicos, leva à formação de tumores da bexiga altamente invasivos, o que a torna um modelo valioso para estudar a progressão do tumor e testar terapêuticas anti-cancro destinadas a impedir a invasão e a metástase.
Este modelo MB49, incluindo a variante MB49-I, é fundamental para a compreensão dos mecanismos moleculares subjacentes à progressão do cancro da bexiga e para o desenvolvimento de novas estratégias terapêuticas. O modelo imita de perto o cancro da bexiga humano, particularmente na sua capacidade de simular as caraterísticas invasivas e metastáticas da doença, proporcionando assim um sistema robusto para estudos pré-clínicos.
- Tecido
- Bexiga urinária
- Doença
- Carcinoma de células de transição da bexiga de ratinho
- Sinónimos
- MB-49
02Classificação
- Organismo
- Rato
- Sexo
- Masculino
- Propriedades de crescimento
- Aderente
- Nível de biossegurança
- 1
03Características
- Morfologia
- Epitelial
- Cariótipo
- Perdeu o cromossoma Y
04Identificadores
- Referência
- MB49 (número de catálogo Cytion 305240)
- Número de identificação fiscal do NCBI
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_7076
05Manuseamento e cultura
- Meio de cultura
- DMEM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-Glutamina, com: 3,7 g/L de NaHCO3, com: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo Cytion 820300a)
- Atmosfera de incubação
37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.
- Suplementos
- Completar o meio com 10% de FBS
- Reagente de dissociação
- Accutase
- Subcultura
- Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
- Descongelamento e cultura
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Controlo de qualidade e criopreservação
- Esterilidade
A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.
- Meio de congelação
- Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
- Condições de armazenamento
Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.
- Condições de envio
As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.
07Doador
- Raça / subespécie
- C57BL/ICRF-a(t)
- Idade do dador
- Adulto
08Aspectos legais e de segurança
- Precauções de segurança
- Quando se planeia armazenar um criovial em nitrogénio líquido para descongelação futura, é obrigatório aderir a medidas de segurança rigorosas. Luvas e vestuário de proteção adequados são essenciais, e a utilização de uma máscara facial ou óculos de segurança é necessária durante a transferência de amostras congeladas para ou do tanque de nitrogénio líquido. Isto destina-se a mitigar o risco de ferimentos provocados por potenciais explosões de crioviais após a remoção, que podem resultar na projeção de fragmentos afiados.
- Garantia
Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto
Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia
- É necessário um Acordo de Transferência de Material
- Sim
09Detalhes do produto
- Tabela de composição