Pāriet uz saturu
MB49
Audums
Urīnpūslis
Slimība
Peles urīnpūšļa pārejas šūnu karcinoma
Sinonīmi
MB-49

Dokumenti

MB49

Cell line · Preces numurs 305240

€600.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

MB49 šūnu līnija ir peļu modelis, kas iegūts no C57BL/6 peļu urīnpūšļa epitēlija šūnām. Tā sākotnēji tika izstrādāta urīnpūšļa vēža izpētei, nodrošinot platformu urīnpūšļa karcinomas bioloģisko un molekulāro īpašību izpētei. Šūnu līniju izveidoja, ķīmiski inducējot urīnpūšļa audzējus, izmantojot kancerogēnu 7,12-dimetilbenz[a]antracēnu (DMBA), kā sīki aprakstīts agrīnos pētījumos. MB49 šūnām piemīt audzēja fenotips, ja tās transplantē sinģēniskām pelēm, veidojot uroteliālas karcinomas. Šie audzēji bieži vien ir vāji diferencēti, un tiem var būt jaukta morfoloģija, tostarp vārpstas formas šūnas un adenokarcinomatozas zonas, kas atgādina agresīvus urīnpūšļa vēža apakštipus, kas novēroti cilvēka patoloģijā.

Turpmāku pētījumu rezultātā tika izstrādāta MB49-I, kas ir invazīvāka MB49 apakšlīnija. Šī apakšlīnija tika izveidota pēc 13 secīgām in vivo pasāžām, palielinot tās invazīvo un metastātisko potenciālu. MB49-I šūnām ir paaugstināta proteolītiskā aktivitāte, jo īpaši tādiem fermentiem kā kacepsīns B, matriksa metaloproteināze 9 (MMP-9) un urokināzes tipa plazminogēna aktivators (uPA). Šie fermenti veicina āršūnu matriksa komponentu sadalīšanos, veicinot audzēja šūnu invazi un metastāzes. MB49-I apakšlīnija, ortotopiski inokulēta singēnisko peļu urīnpūslī, izraisa ļoti invazīvu urīnpūšļa audzēju veidošanos, padarot to par vērtīgu modeli audzēja progresijas izpētei un pretvēža terapijas līdzekļu testēšanai, lai novērstu invazi un metastāzes.

Šis MB49 modelis, tostarp MB49-I variants, ir noderīgs, lai izprastu urīnpūšļa vēža progresēšanas molekulāros mehānismus un izstrādātu jaunas terapeitiskās stratēģijas. Šis modelis precīzi atdarina cilvēka urīnpūšļa vēzi, jo īpaši attiecībā uz spēju simulēt slimības invazīvās un metastātiskās īpašības, tādējādi nodrošinot stabilu sistēmu preklīniskajiem pētījumiem.

Audums
Urīnpūslis
Slimība
Peles urīnpūšļa pārejas šūnu karcinoma
Sinonīmi
  • MB-49

02Klasifikācija

Organisms
Pele
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija
Kariotips
Ir zaudējis Y hromosomu

04Identifikatori

Atsauce
MB49 (Cytion kataloga numurs 305240)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10090
Cellosaurus
CVCL_7076

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Šķirne / pasuga
C57BL/ICRF-a(t)
Donora vecums
Pieaugušo

09Informācija par produktu

Sastāva tabula