
- Tissue
- Poumon, plèvre
- Synonyms
- MeT-5A, MeT 5A, MeT5A, Met5A, MET5A, Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A
Documents
MET-5A
Cell line · Product number 305269
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
La lignée cellulaire MET-5A est dérivée de cellules mésothéliales de la plèvre d’un adulte humain et est souvent utilisée dans la recherche sur le mésothéliome, un type de cancer qui touche la membrane mésothéliale des poumons, de l’abdomen et du cœur. Ces cellules sont essentielles à l’étude de la biologie, de la pathogenèse et du traitement du mésothéliome, notamment pour comprendre comment des facteurs environnementaux, tels que l’exposition à l’amiante, conduisent au développement de ce cancer. Les cellules MET-5A servent également à explorer les mécanismes de transformation cellulaire, la progression tumorale et les réponses cellulaires à divers agents chimiothérapeutiques.
Les cellules MET-5A présentent une morphologie épithéliale typique et conservent les caractéristiques des cellules mésothéliales normales, notamment l’expression de marqueurs mésothéliaux tels que la cytokératine et la vimentine. Ces cellules réagissent aux stimuli inflammatoires et peuvent être utilisées pour étudier les processus inflammatoires impliqués dans la pathogenèse du mésothéliome. Les chercheurs utilisent les cellules MET-5A pour étudier les altérations génétiques et moléculaires associées au mésothéliome, ainsi que pour évaluer l’efficacité et la toxicité de composés thérapeutiques potentiels. La pertinence des cellules MET-5A pour la modélisation de la biologie des cellules mésothéliales et leur rôle dans la recherche sur le mésothéliome en font un outil essentiel pour faire progresser notre compréhension et le traitement de ce cancer agressif.
- Tissue
- Poumon, plèvre
- Synonyms
- MeT-5A
- MeT 5A
- MeT5A
- Met5A
- MET5A
- Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This human mesothelial cell line (MET-5A) contains an SV40 T-Antigen construct introduced via plasmid transfection, enabling immortalization. The construct is stably integrated into mesothelial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- Épithélial
- Cell type
- Cellule mésothéliale
- Tumourigenic
- Non
04Identifiers
- Citation
- MET-5A (numéro de catalogue Cytion 305269)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_3749
05Expression and susceptibility
- Protein expression
- Vimentine, kératines, antigène T du SV40
- Viruses
- Transformant : virus simien 40 (SV40)
06Handling and culture
- Culture medium
- Milieu 199, w : 1,5 g/L de NaHCO₃
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.
- Supplements
Ajouter au milieu 15 % de FBS, 15 mM d’HEPES et 1 % d’ITS+
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
- Fluid renewal
- 2 à 3 fois par semaine
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.
Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.
- Freeze medium
- Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
- Storage conditions
Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.
- Shipping conditions
Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.
08Donor
- Donor age
- Adulte
09Legal and safety
- Safety precautions
- Lorsqu’on prévoit entreposer un cryotube dans de l’azote liquide en vue d’une décongélation ultérieure, il est impératif de respecter des mesures de sécurité rigoureuses. Le port de gants et de vêtements de protection appropriés est essentiel, et l’utilisation d’un masque facial ou de lunettes de protection est obligatoire lors du transfert d’échantillons congelés vers ou depuis le réservoir d’azote liquide. Cette précaution vise à réduire le risque de blessure causé par d’éventuelles explosions de cryotubes lors de leur retrait, pouvant entraîner la projection de fragments coupants.
- Warranty
Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.
Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
10Product details
- Composition table