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MET-5A
Tissue
Pulmão, pleura
Synonyms
MeT-5A, MeT 5A, MeT5A, Met5A, MET5A, Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A

Documents

MET-5A

Cell line · Product number 305269

US$395.00excl. tax and shipping
Made to order
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

A linhagem celular MET-5A é derivada de células mesoteliais da pleura de um adulto humano e é frequentemente utilizada em pesquisas relacionadas ao mesotelioma, um tipo de câncer que afeta o revestimento mesotelial dos pulmões, do abdômen e do coração. Essas células são essenciais para o estudo da biologia, da patogênese e do tratamento do mesotelioma, especialmente para compreender como fatores ambientais, como a exposição ao amianto, levam ao desenvolvimento desse câncer. As células MET-5A também são utilizadas para explorar os mecanismos de transformação celular, a progressão tumoral e as respostas celulares a diversos agentes quimioterápicos.

As células MET-5A apresentam uma morfologia epitelial típica e mantêm características das células mesoteliais normais, incluindo a expressão de marcadores mesoteliais, como a citoqueratina e a vimentina. Essas células respondem a estímulos inflamatórios e podem ser utilizadas para estudar os processos inflamatórios envolvidos na patogênese do mesotelioma. Pesquisadores utilizam as células MET-5A para investigar as alterações genéticas e moleculares associadas ao mesotelioma, bem como para testar a eficácia e a toxicidade de possíveis compostos terapêuticos. A relevância das células MET-5A na modelagem da biologia das células mesoteliais e seu papel na pesquisa do mesotelioma as tornam uma ferramenta essencial para o avanço de nossa compreensão e do tratamento desse câncer agressivo.

Tissue
Pulmão, pleura
Synonyms
  • MeT-5A
  • MeT 5A
  • MeT5A
  • Met5A
  • MET5A
  • Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This human mesothelial cell line (MET-5A) contains an SV40 T-Antigen construct introduced via plasmid transfection, enabling immortalization. The construct is stably integrated into mesothelial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Epithelial
Cell type
Célula mesotelial
Tumourigenic
Não

04Identifiers

Citation
MET-5A (número de catálogo da Cytion 305269)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_3749

05Expression and susceptibility

Protein expression
Vimentina, queratinas, antígeno T do SV40
Viruses
Transformante: Vírus simiano 40 (SV40)

06Handling and culture

Culture medium
Meio 199, c: 1,5 g/L de NaHCO₃
Incubation atmosphere

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

Supplements

Adicione ao meio 15% de FBS, 15 mM de HEPES e 1% de ITS+

Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco.
Fluid renewal
2 a 3 vezes por semana
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Freeze medium
Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
Storage conditions

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

Shipping conditions

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

08Donor

Donor age
Adulto

10Product details

Composition table