Mine otse sisu juurde
MET-5A
Kude
Kops, kopsukelme
Sünonüümid
MeT-5A, MeT 5A, MeT5A, Met5A, MET5A, Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A

Dokumendid

MET-5A

Cell line · Toote number 305269

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Tellimusel valmistatud
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

MET-5A rakuliin on saadud inimese täiskasvanud inimese kopsukelme mesoteelirakkudest ja seda kasutatakse sageli mesotelioomi (kopsude, kõhu ja südame mesoteelioloogilist vooderdist mõjutav vähitüüp) uurimisel. Need rakud on üliolulised mesotelioomi bioloogia, patogeneesi ja ravi uurimiseks, eelkõige selleks, et mõista, kuidas keskkonnategurid, näiteks asbestiga kokkupuude, põhjustavad selle vähi teket. MET-5A rakke kasutatakse ka rakkude muundumise, kasvaja progresseerumise ja rakkude vastuse uurimiseks erinevatele kemoterapeutilistele ainetele.

MET-5A rakkudel on tüüpiline epiteeli morfoloogia ja nad säilitavad normaalsete mesoteelirakkude omadused, sealhulgas mesoteeli markerite, nagu tsütokeratiin ja vimentiin, ekspressiooni. Need rakud reageerivad põletikulistele stiimulitele ja neid saab kasutada mesotelioomi patogeneesis osalevate põletikuprotsesside uurimiseks. Teadlased kasutavad MET-5A rakke mesotelioomiga seotud geneetiliste ja molekulaarsete muutuste uurimiseks, samuti võimalike terapeutiliste ühendite tõhususe ja toksilisuse testimiseks. MET-5A rakkude tähtsus mesoteelirakkude bioloogia modelleerimisel ja nende roll mesotelioomi uurimisel teeb neist olulise vahendi selle agressiivse vähktõve mõistmise ja ravi edendamiseks.

Kude
Kops, kopsukelme
Sünonüümid
  • MeT-5A
  • MeT 5A
  • MeT5A
  • Met5A
  • MET5A
  • Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-S1
GMO-staatuse üksikasjad
GMO-S1: This human mesothelial cell line (MET-5A) contains an SV40 T-Antigen construct introduced via plasmid transfection, enabling immortalization. The construct is stably integrated into mesothelial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteel
Rakutüüp
Mesoteeli rakk
Tuumorigeenne
Ei

04Tunnused

Viide
MET-5A (Cytioni katalooginumber 305269)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_3749

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Valgu ekspressioon
Vimentiin, keratiinid, SV40 T antigeen
Viirused
Transformant: simian virus 40 (SV40)

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
Keskkond 199, w: 1,5 g/L NaHCO3
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid

Lisage kasvukeskkonnale 15% FBS-i, 15 mM HEPES-i ja 1% ITS+'i

Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
Täiskasvanud

10Toote üksikasjad

Koostis tabel