Siirry sisältöön
MET-5A
Kudos
Keuhkot, keuhkopussi
Synonyymit
MeT-5A, MeT 5A, MeT5A, Met5A, MET5A, Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A

Asiakirjat

MET-5A

Cell line · Tuotenumero 305269

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja

Räätälöinti / Suositukset

Valmistetaan tilauksesta
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

MET-5A-solulinja on peräisin ihmisen aikuisen keuhkopussin mesoteelisoluista, ja sitä käytetään usein mesoteliooman tutkimuksessa. Kyseessä on syöpätyyppi, joka vaikuttaa keuhkojen, vatsaontelon ja sydämen mesoteelivuoriin. Nämä solut ovat ratkaisevan tärkeitä mesoteliooman biologian, patogeneesin ja hoidon tutkimisessa ja erityisesti sen ymmärtämisessä, miten ympäristötekijät, kuten asbestialtistus, johtavat tämän syövän kehittymiseen. MET-5A-soluja käytetään myös solumuutoksen mekanismien, kasvaimen etenemisen ja soluvasteiden tutkimiseen erilaisille kemoterapeuttisille aineille.

MET-5A-soluilla on tyypillinen epiteelimorfologia, ja niissä on normaalien mesoteelisolujen ominaisuuksia, kuten mesoteelin merkkiaineiden, kuten sytokeratiinin ja vimentiinin, ilmentyminen. Nämä solut reagoivat tulehdusärsykkeisiin, ja niitä voidaan käyttää mesoteliooman patogeneesiin liittyvien tulehdusprosessien tutkimiseen. Tutkijat käyttävät MET-5A-soluja mesotelioomaan liittyvien geneettisten ja molekulaaristen muutosten tutkimiseen sekä mahdollisten terapeuttisten yhdisteiden tehokkuuden ja toksisuuden testaamiseen. MET-5A-solujen merkitys mesoteelisolujen biologian mallintamisessa ja niiden rooli mesotelioomatutkimuksessa tekevät niistä olennaisen tärkeän välineen tämän aggressiivisen syövän ymmärtämisen ja hoidon edistämiseksi.

Kudos
Keuhkot, keuhkopussi
Synonyymit
  • MeT-5A
  • MeT 5A
  • MeT5A
  • Met5A
  • MET5A
  • Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
GMO-status
GMO-S1
GMO-statuksen tiedot
GMO-S1: This human mesothelial cell line (MET-5A) contains an SV40 T-Antigen construct introduced via plasmid transfection, enabling immortalization. The construct is stably integrated into mesothelial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteeli
Solutyyppi
Mesoteelisolu
Kasvaimia aiheuttava
Ei

04Tunnisteet

Lähdeviite
MET-5A (Cytionin luettelonumero 305269)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_3749

05Ilmentyminen ja alttius

Proteiinin ilmentyminen
Vimentiini, keratiinit, SV40 T-antigeeni
Virukset
Transformantti: Simian virus 40 (SV40)

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
Väliaine 199, w: 1,5 g/L NaHCO3
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät

Lisää elatusaineeseen 15 % FBS:ää, 15 mM HEPES:ää ja 1 % ITS+:aa

Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
Aikuiset

10Tuotetiedot

Koostumustaulukko