
- Tecido
- Pulmão, pleura
- Sinónimos
- MeT-5A, MeT 5A, MeT5A, Met5A, MET5A, Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A
Documentos
MET-5A
Cell line · Número do produto 305269
Personalização / Recomendações
- MET-5ACell line€430.00
Recomendado (lote mais recente)
01Informações gerais
- Descrição
A linha celular MET-5A é derivada de células mesoteliais da pleura de um adulto humano e é frequentemente utilizada na investigação relacionada com o mesotelioma, um tipo de cancro que afecta o revestimento mesotelial dos pulmões, do abdómen e do coração. Estas células são cruciais para o estudo da biologia, da patogénese e do tratamento do mesotelioma, especialmente para compreender como os factores ambientais, como a exposição ao amianto, conduzem ao desenvolvimento deste cancro. As células MET-5A são também utilizadas para explorar os mecanismos de transformação celular, a progressão tumoral e as respostas celulares a vários agentes quimioterapêuticos.
As células MET-5A apresentam uma morfologia epitelial típica e retêm caraterísticas das células mesoteliais normais, incluindo a expressão de marcadores mesoteliais como a citoqueratina e a vimentina. Estas células respondem a estímulos inflamatórios e podem ser utilizadas para estudar os processos inflamatórios envolvidos na patogénese do mesotelioma. Os investigadores utilizam as células MET-5A para investigar as alterações genéticas e moleculares associadas ao mesotelioma, bem como para testar a eficácia e a toxicidade de potenciais compostos terapêuticos. A relevância das células MET-5A na modelação da biologia das células mesoteliais e o seu papel na investigação do mesotelioma tornam-nas uma ferramenta essencial para o avanço da nossa compreensão e do tratamento deste cancro agressivo.
- Tecido
- Pulmão, pleura
- Sinónimos
- MeT-5A
- MeT 5A
- MeT5A
- Met5A
- MET5A
- Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A
02Classificação
- Organismo
- Humano
- Sexo
- Masculino
- Propriedades de crescimento
- Aderente
- Estatuto em matéria de OGM
- GMO-S1
- Detalhes sobre o estatuto dos OGM
- GMO-S1: This human mesothelial cell line (MET-5A) contains an SV40 T-Antigen construct introduced via plasmid transfection, enabling immortalization. The construct is stably integrated into mesothelial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Nível de biossegurança
- 1
03Características
- Morfologia
- Epitelial
- Tipo de célula
- Célula mesotelial
- Tumorigénico
- Não
04Identificadores
- Referência
- MET-5A (número de catálogo Cytion 305269)
- Número de identificação fiscal do NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_3749
05Expressão e suscetibilidade
- Expressão proteica
- Vimentina, queratinas, antigénio SV40 T
- Vírus
- Transformante: Vírus símio 40 (SV40)
06Manuseamento e cultura
- Meio de cultura
- Meio 199, w: 1,5 g/L NaHCO3
- Atmosfera de incubação
37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.
- Suplementos
Adicione ao meio 15 % de FBS, 15 mM de HEPES e 1 % de ITS+
- Reagente de dissociação
- Accutase
- Subcultura
- Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
- Renovação de fluidos
- 2 a 3 vezes por semana
- Descongelamento e cultura
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Controlo de qualidade e criopreservação
- Esterilidade
A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.
- Meio de congelação
- Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
- Condições de armazenamento
Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.
- Condições de envio
As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.
08Doador
- Idade do dador
- Adulto
09Aspectos legais e de segurança
- Precauções de segurança
- Quando se planeia armazenar um criovial em nitrogénio líquido para descongelação futura, é obrigatório aderir a medidas de segurança rigorosas. Luvas e vestuário de proteção adequados são essenciais, e a utilização de uma máscara facial ou óculos de segurança é necessária durante a transferência de amostras congeladas para ou do tanque de nitrogénio líquido. Isto destina-se a mitigar o risco de ferimentos provocados por potenciais explosões de crioviais após a remoção, que podem resultar na projeção de fragmentos afiados.
- Garantia
Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto
Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia
- É necessário um Acordo de Transferência de Material
- Sim
10Detalhes do produto
- Tabela de composição