Skip to content
MET-5A
Tissue
ปอด เยื่อหุ้มปอด
Synonyms
MeT-5A, MeT 5A, MeT5A, Met5A, MET5A, Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A

Documents

MET-5A

Cell line · Product number 305269

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

Made to order
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

สายเซลล์ MET-5A ได้มาจากเซลล์เยื่อบุช่องเยื่อหุ้มปอดของมนุษย์ในผู้ใหญ่ และมักใช้ในการวิจัยที่เกี่ยวข้องกับมะเร็งเยื่อบุช่องเยื่อหุ้มปอด ซึ่งเป็นมะเร็งชนิดหนึ่งที่ส่งผลกระทบต่อเยื่อบุช่องเยื่อหุ้มปอด ช่องท้อง และหัวใจ เซลล์เหล่านี้มีความสำคัญอย่างยิ่งในการศึกษาชีววิทยา กระบวนการเกิดโรค และการรักษาของมะเร็งเยื่อบุช่องเยื่อหุ้มปอด โดยเฉพาะอย่างยิ่งในการทำความเข้าใจว่าปัจจัยสิ่งแวดล้อม เช่น การสัมผัสแร่ใยหิน ส่งผลให้เกิดมะเร็งชนิดนี้ได้อย่างไรเซลล์ MET-5A ยังถูกใช้ในการศึกษาเกี่ยวกับกลไกการเปลี่ยนแปลงของเซลล์, การเจริญเติบโตของเนื้องอก, และการตอบสนองของเซลล์ต่อสารเคมีบำบัดต่าง ๆ

เซลล์ MET-5A แสดงลักษณะทางสัณฐานวิทยาของเซลล์เยื่อบุผิวแบบปกติและคงลักษณะของเซลล์เยื่อบุช่องท้องปกติไว้ รวมถึงการแสดงออกของตัวบ่งชี้เซลล์เยื่อบุช่องท้อง เช่น ไคโตแครทินและวีเมนติน เซลล์เหล่านี้ตอบสนองต่อสิ่งกระตุ้นการอักเสบและสามารถใช้ศึกษาเกี่ยวกับกระบวนการอักเสบที่เกี่ยวข้องกับการเกิดโรคเยื่อบุช่องท้องอักเสบจากแร่ใยหินนักวิจัยใช้เซลล์ MET-5A ในการศึกษาการเปลี่ยนแปลงทางพันธุกรรมและระดับโมเลกุลที่เกี่ยวข้องกับมะเร็งเยื่อหุ้มปอด รวมถึงทดสอบประสิทธิภาพและความเป็นพิษของสารประกอบที่อาจใช้เป็นยา การที่เซลล์ MET-5A มีความเกี่ยวข้องในการจำลองชีววิทยาของเซลล์เยื่อบุและบทบาทในการวิจัยมะเร็งเยื่อหุ้มปอด ทำให้เซลล์เหล่านี้เป็นเครื่องมือสำคัญในการพัฒนาความเข้าใจและการรักษาโรคมะเร็งที่รุนแรงนี้

Tissue
ปอด เยื่อหุ้มปอด
Synonyms
  • MeT-5A
  • MeT 5A
  • MeT5A
  • Met5A
  • MET5A
  • Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This human mesothelial cell line (MET-5A) contains an SV40 T-Antigen construct introduced via plasmid transfection, enabling immortalization. The construct is stably integrated into mesothelial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
เยื่อบุผิว
Cell type
เซลล์เยื่อบุผิว
Tumourigenic
ไม่

04Identifiers

Citation
MET-5A (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305269)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_3749

05Expression and susceptibility

Protein expression
วีเมนติน, เคราติน, เอสวี40 ที แอนติเจน
Viruses
ทรานส์ฟอร์แมนท์: ไวรัสซิเมียน 40 (SV40)

06Handling and culture

Culture medium
ขนาดกลาง 199, w: 1.5 กรัม/ลิตร NaHCO3
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements

เติม FBS 15%, HEPES 15 mM และ ITS+ 1% ลงในสื่อเพาะเลี้ยง

Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
ผู้ใหญ่

10Product details

Composition table