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MET-5A
Gewebe
Lunge, Rippenfell
Synonyme
MeT-5A, MeT 5A, MeT5A, Met5A, MET5A, Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A

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MET-5A

Cell line · Artikelnummer 305269

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die Zelllinie MET-5A wird aus Mesothelzellen des Rippenfells eines erwachsenen Menschen gewonnen und häufig in der Forschung zum Mesotheliom eingesetzt, einer Krebsart, die die Mesothelzellen der Lunge, des Bauchraums und des Herzens befällt. Diese Zellen sind für die Untersuchung der Biologie, Pathogenese und Behandlung des Mesothelioms von entscheidender Bedeutung, insbesondere um zu verstehen, wie Umweltfaktoren wie die Asbestexposition zur Entwicklung dieses Krebses führen. MET-5A-Zellen werden auch zur Erforschung der Mechanismen der Zelltransformation, der Tumorprogression und der zellulären Reaktionen auf verschiedene Chemotherapeutika verwendet.

MET-5A-Zellen weisen eine typische epitheliale Morphologie auf und besitzen Merkmale normaler Mesothelzellen, einschließlich der Expression von Mesothelmarkern wie Cytokeratin und Vimentin. Diese Zellen reagieren auf Entzündungsreize und können zur Untersuchung der an der Mesotheliom-Pathogenese beteiligten Entzündungsprozesse verwendet werden. Forscher setzen MET-5A-Zellen ein, um die mit Mesotheliomen verbundenen genetischen und molekularen Veränderungen zu untersuchen und die Wirksamkeit und Toxizität potenzieller therapeutischer Substanzen zu testen. Die Bedeutung von MET-5A-Zellen für die Modellierung der Biologie von Mesothelzellen und ihre Rolle in der Mesotheliomforschung machen sie zu einem wichtigen Instrument, um das Verständnis und die Behandlung dieser aggressiven Krebsart voranzutreiben.

Gewebe
Lunge, Rippenfell
Synonyme
  • MeT-5A
  • MeT 5A
  • MeT5A
  • Met5A
  • MET5A
  • Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
GVO-Status
GMO-S1
Angaben zum GVO-Status
GMO-S1: This human mesothelial cell line (MET-5A) contains an SV40 T-Antigen construct introduced via plasmid transfection, enabling immortalization. The construct is stably integrated into mesothelial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelial
Zelltyp
Mesothelzelle
Tumorauslösend
Nein

04Bezeichner

Quellenangabe
MET-5A (Cytion-Katalognummer 305269)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_3749

05Expression und Anfälligkeit

Proteinexpression
Vimentin, Keratine, SV40 T-Antigen
Viren
Transformant: Simian-Virus 40 (SV40)

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
Medium 199, w: 1,5 g/L NaHCO3
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel

Das Medium mit 15 % FBS, 15 mM HEPES und 1 % ITS+ ergänzen

Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
Erwachsener

10Produktdetails

Zusammensetzungstabelle