
- Tissue
- ריאה, צדר
- Synonyms
- MeT-5A, MeT 5A, MeT5A, Met5A, MET5A, Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A
Documents
MET-5A
Cell line · Product number 305269
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
קו התאים MET-5A נגזר מתאי מזותליום של הצדר בבני אדם בוגרים, ומשמש לעתים קרובות במחקרים הקשורים למזותליומה, סוג של סרטן הפוגע ברירית המזותליום של הריאות, הבטן והלב. תאים אלה חיוניים לחקר הביולוגיה, הפתוגנזה והטיפול במזותליומה, במיוחד בהבנת האופן שבו גורמים סביבתיים כגון חשיפה לאסבסט מובילים להתפתחות סרטן זה. תאי MET-5A משמשים גם לחקר המנגנונים של שינוי תאי, התקדמות הגידול והתגובות התאיות לסוכנים כימותרפיים שונים.
תאי MET-5A מציגים מורפולוגיה אפיתלית טיפוסית ושומרים על מאפיינים של תאי מזותליום נורמליים, כולל ביטוי של סמנים מזותליאליים כגון ציטוקראטין ווימנטין. תאים אלה מגיבים לגירויים דלקתיים וניתן להשתמש בהם לחקר התהליכים הדלקתיים המעורבים בפתוגנזה של מזותליומה. חוקרים משתמשים בתאי MET-5A כדי לחקור את השינויים הגנטיים והמולקולריים הקשורים למזותליומה, וכן כדי לבדוק את היעילות והרעילות של תרכובות טיפוליות פוטנציאליות. הרלוונטיות של תאי MET-5A במודלים של ביולוגיה של תאי מזותליום ותפקידם במחקר מזותליומה הופכים אותם לכלי חיוני לקידום ההבנה והטיפול בסרטן אגרסיבי זה.
- Tissue
- ריאה, צדר
- Synonyms
- MeT-5A
- MeT 5A
- MeT5A
- Met5A
- MET5A
- Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This human mesothelial cell line (MET-5A) contains an SV40 T-Antigen construct introduced via plasmid transfection, enabling immortalization. The construct is stably integrated into mesothelial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- אפיתל
- Cell type
- תא מזותלי
- Tumourigenic
- לא
04Identifiers
- Citation
- MET-5A (מספר קטלוגי Cytion 305269)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_3749
05Expression and susceptibility
- Protein expression
- וימנטין, קרטין, אנטיגן SV40 T
- Viruses
- טרנספורמנט: נגיף סימיאן 40 (SV40)
06Handling and culture
- Culture medium
- בינוני 199, w: 1.5 g/L NaHCO3
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
יש להוסיף למדיום 15% FBS, 15 מ"מ HEPES, 1% ITS+
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Donor age
- מבוגר
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes
10Product details
- Composition table