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MET-5A
Tessuto
Polmone, pleura
Sinonimi
MeT-5A, MeT 5A, MeT5A, Met5A, MET5A, Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A

Documenti

MET-5A

Cell line · Codice prodotto 305269

€430.00IVA e spese di spedizione escluse

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare MET-5A deriva dalle cellule mesoteliali della pleura di un adulto umano e viene spesso utilizzata nella ricerca sul mesotelioma, un tipo di cancro che colpisce il rivestimento mesoteliale dei polmoni, dell'addome e del cuore. Queste cellule sono fondamentali per studiare la biologia, la patogenesi e il trattamento del mesotelioma, in particolare per capire come i fattori ambientali, come l'esposizione all'amianto, portino allo sviluppo di questo tumore. Le cellule MET-5A sono utilizzate anche per esplorare i meccanismi di trasformazione cellulare, la progressione tumorale e le risposte cellulari a vari agenti chemioterapici.

Le cellule MET-5A presentano una tipica morfologia epiteliale e conservano le caratteristiche delle normali cellule mesoteliali, compresa l'espressione di marcatori mesoteliali come la citocheratina e la vimentina. Queste cellule sono reattive agli stimoli infiammatori e possono essere utilizzate per studiare i processi infiammatori coinvolti nella patogenesi del mesotelioma. I ricercatori impiegano le cellule MET-5A per studiare le alterazioni genetiche e molecolari associate al mesotelioma e per testare l'efficacia e la tossicità di potenziali composti terapeutici. La rilevanza delle cellule MET-5A nel modellare la biologia delle cellule mesoteliali e il loro ruolo nella ricerca sul mesotelioma le rendono uno strumento essenziale per progredire nella comprensione e nel trattamento di questo tumore aggressivo.

Tessuto
Polmone, pleura
Sinonimi
  • MeT-5A
  • MeT 5A
  • MeT5A
  • Met5A
  • MET5A
  • Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Presenza di OGM
GMO-S1
Dettagli sullo stato degli OGM
GMO-S1: This human mesothelial cell line (MET-5A) contains an SV40 T-Antigen construct introduced via plasmid transfection, enabling immortalization. The construct is stably integrated into mesothelial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Epiteliale
Tipo di cellula
Cellula mesoteliale
Tumorigenico
No

04Identificatori

Riferimento bibliografico
MET-5A (numero di catalogo Cytion 305269)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_3749

05Espressione e suscettibilità

Espressione proteica
Vimentina, cheratine, antigene SV40 T
Virus
Trasformante: Simian virus 40 (SV40)

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
Terreno 199, w: 1,5 g/L NaHCO3
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori

Aggiungere al terreno di coltura il 15% di FBS, 15 mM di HEPES e l'1% di ITS+

Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
Adulti

10Dettagli sul prodotto

Tabella delle composizioni