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MET-5A
Tissue
Pulmón, pleura
Synonyms
MeT-5A, MeT 5A, MeT5A, Met5A, MET5A, Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A

Documents

MET-5A

Cell line · Product number 305269

US$395.00excl. tax and shipping
Made to order
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

La línea celular MET-5A se deriva de células mesoteliales de la pleura de un adulto humano y se utiliza con frecuencia en investigaciones relacionadas con el mesotelioma, un tipo de cáncer que afecta al revestimiento mesotelial de los pulmones, el abdomen y el corazón. Estas células son fundamentales para estudiar la biología, la patogénesis y el tratamiento del mesotelioma, especialmente para comprender cómo factores ambientales, como la exposición al asbesto, conducen al desarrollo de este cáncer. Las células MET-5A también se utilizan para investigar los mecanismos de transformación celular, la progresión tumoral y las respuestas celulares a diversos agentes quimioterapéuticos.

Las células MET-5A presentan una morfología epitelial típica y conservan las características de las células mesoteliales normales, incluida la expresión de marcadores mesoteliales como la citoqueratina y la vimentina. Estas células responden a estímulos inflamatorios y pueden utilizarse para estudiar los procesos inflamatorios implicados en la patogénesis del mesotelioma. Los investigadores emplean las células MET-5A para investigar las alteraciones genéticas y moleculares asociadas con el mesotelioma, así como para evaluar la eficacia y la toxicidad de posibles compuestos terapéuticos. La relevancia de las células MET-5A en la modelación de la biología de las células mesoteliales y su papel en la investigación del mesotelioma las convierten en una herramienta esencial para avanzar en nuestra comprensión y el tratamiento de este cáncer agresivo.

Tissue
Pulmón, pleura
Synonyms
  • MeT-5A
  • MeT 5A
  • MeT5A
  • Met5A
  • MET5A
  • Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This human mesothelial cell line (MET-5A) contains an SV40 T-Antigen construct introduced via plasmid transfection, enabling immortalization. The construct is stably integrated into mesothelial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Epithelial
Cell type
Célula mesotelial
Tumourigenic
No

04Identifiers

Citation
MET-5A (número de catálogo de Cytion 305269)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_3749

05Expression and susceptibility

Protein expression
Vimentina, queratinas, antígeno T del SV40
Viruses
Transformante: Virus simio 40 (SV40)

06Handling and culture

Culture medium
Medio 199, p: 1,5 g/L de NaHCO₃
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

Supplements

Añada al medio un 15 % de FBS, 15 mM de HEPES y un 1 % de ITS+

Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Retira el medio usado de las células adheridas y lávalas con PBS sin calcio ni magnesio. Para los frascos T25, usa de 3 a 5 ml de PBS, y para los frascos T75, usa de 5 a 10 ml. Luego, cubra las células por completo con Accutase, utilizando de 1 a 2 ml para los frascos T25 y 2,5 ml para los frascos T75. Deje que las células se incuben a temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos para desprenderse. Después de la incubación, mezcla suavemente las células con 10 ml de medio para resuspendarlas; luego, centrifuga a 300xg durante 3 minutos. Deseche el sobrenadante, resuspenda las células en medio fresco y transfiéralas a frascos nuevos que ya contengan medio fresco.
Fluid renewal
De 2 a 3 veces por semana
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Freeze medium
Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
Storage conditions

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Shipping conditions

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

08Donor

Donor age
Adulto

10Product details

Composition table