Pāriet uz saturu
MET-5A
Audums
Plaušas, pleiras
Sinonīmi
MeT-5A, MeT 5A, MeT5A, Met5A, MET5A, Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A

Dokumenti

MET-5A

Cell line · Preces numurs 305269

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Pēc pasūtījuma
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

MET-5A šūnu līnija ir iegūta no pieaugušo cilvēku pleiras mezoteliālajām šūnām, un to bieži izmanto pētījumos, kas saistīti ar mezoteliomu - vēža veidu, kas skar plaušu, vēdera un sirds mezoteliālo gļotādu. Šīs šūnas ir ļoti svarīgas mezoteliomas bioloģijas, patoģenēzes un ārstēšanas pētījumos, jo īpaši, lai saprastu, kā vides faktori, piemēram, azbesta iedarbība, izraisa šī vēža attīstību. MET-5A šūnas izmanto arī, lai pētītu šūnu transformācijas mehānismus, audzēja progresēšanu un šūnu reakciju uz dažādiem ķīmijterapeitiskiem līdzekļiem.

MET-5A šūnām ir tipiska epitēlija morfoloģija, un tās saglabā normālu mezoteliālo šūnu īpašības, tostarp tādu mezoteliālo marķieru kā citokeratīna un vimentīna ekspresiju. Šīs šūnas reaģē uz iekaisuma stimuliem, un tās var izmantot, lai pētītu iekaisuma procesus, kas saistīti ar mezoteliomas patoģenēzi. Pētnieki izmanto MET-5A šūnas, lai pētītu ģenētiskās un molekulārās izmaiņas, kas saistītas ar mezoteliomu, kā arī lai pārbaudītu potenciālo terapeitisko savienojumu efektivitāti un toksicitāti. MET-5A šūnu nozīme mezoteliālo šūnu bioloģijas modelēšanā un to loma mezoteliomas pētniecībā padara tās par būtisku līdzekli, lai uzlabotu mūsu izpratni par šo agresīvo vēzi un tā ārstēšanu.

Audums
Plaušas, pleiras
Sinonīmi
  • MeT-5A
  • MeT 5A
  • MeT5A
  • Met5A
  • MET5A
  • Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
GMO-S1
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
GMO-S1: This human mesothelial cell line (MET-5A) contains an SV40 T-Antigen construct introduced via plasmid transfection, enabling immortalization. The construct is stably integrated into mesothelial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija
Šūnu tips
Mezoteliālā šūna
Tumorogēns
Nē

04Identifikatori

Atsauce
MET-5A (Cytion kataloga numurs 305269)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_3749

05Pazīmes un uzņēmība

Proteīnu ekspresija
Vimentīns, keratīni, SV40 T antigēns
Vīrusi
Transformants: Sīmiāna vīruss 40 (SV40)

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
Barotne 199, w: 1,5 g/l NaHCO3
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi

Papildiniet barotni ar 15 % FBS, 15 mM HEPES, 1 % ITS+

Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
Pieaugušo

10Informācija par produktu

Sastāva tabula