الانتقال إلى المحتوى
MET-5A
الأنسجة
الرئة، غشاء الجنب
المرادفات
MeT-5A, MeT 5A, MeT5A, Met5A, MET5A, Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A

المستندات

MET-5A

Cell line · رقم المنتج 305269

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

حسب الطلب
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

يُشتق خط الخلايا MET-5A من خلايا الظهارة المتوسطة في غشاء الجنب لدى الإنسان البالغ، وغالباً ما يُستخدم في الأبحاث المتعلقة بورم الظهارة المتوسطة، وهو نوع من السرطان الذي يصيب بطانة الظهارة المتوسطة في الرئتين والبطن والقلب. تُعد هذه الخلايا ضرورية لدراسة بيولوجيا ورم الظهارة المتوسطة والتسبب في الإصابة به وعلاجه، خاصةً في فهم كيف تؤدي العوامل البيئية مثل التعرض للأسبستوس إلى تطور هذا السرطان. كما تُستخدم خلايا MET-5A أيضاً لاستكشاف آليات التحول الخلوي وتطور الورم والاستجابات الخلوية لعوامل العلاج الكيميائي المختلفة.

تُظهر خلايا MET-5A مورفولوجيا طلائية نموذجية وتحتفظ بخصائص الخلايا الظهارية الطبيعية بما في ذلك التعبير عن علامات الظهارة المتوسطة مثل السيتوكراتين والفمنتين. تستجيب هذه الخلايا للمحفزات الالتهابية ويمكن استخدامها لدراسة العمليات الالتهابية التي تنطوي عليها عملية التسبب في ورم الظهارة المتوسطة. يستخدم الباحثون خلايا MET-5A لدراسة التغيرات الجينية والجزيئية المرتبطة بورم الظهارة المتوسطة وكذلك لاختبار فعالية وسمية المركبات العلاجية المحتملة. إن أهمية خلايا MET-5A في نمذجة بيولوجيا خلايا الظهارة المتوسطة ودورها في أبحاث ورم الظهارة المتوسطة يجعلها أداة أساسية لتطوير فهمنا وعلاجنا لهذا السرطان العدواني.

الأنسجة
الرئة، غشاء الجنب
المرادفات
  • MeT-5A
  • MeT 5A
  • MeT5A
  • Met5A
  • MET5A
  • Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
ذكر
خصائص النمو
الملتزم
حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
GMO-S1
تفاصيل حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
GMO-S1: This human mesothelial cell line (MET-5A) contains an SV40 T-Antigen construct introduced via plasmid transfection, enabling immortalization. The construct is stably integrated into mesothelial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
الظهارة
نوع الخلية
الخلية الظهارية
مُسبِّب للأورام
لا يوجد

04المعرّفات

المرجع
MET-5A (الرقم الكتالوجي لسيتيون 305269)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_3749

05التعبير والقابلية للإصابة

التعبير البروتيني
فيمنتين، كيراتين، مستضد SV40 T
الفيروسات
المتحول: فيروس سيميان 40 (SV40)

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
وسط 199، ث: 1.5 جم/لتر NaHCO3
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية

أضف إلى الوسط 15% من مصل الأجنة البشري (FBS)، و15 مليمولار من HEPES، و1% من ITS+

كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
للبالغين

10تفاصيل المنتج

جدول التركيب